一种含聚乙二醇非离子亲水基团的新型水溶性荧光染料的-应用化学.PDF

第３３卷 第１期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．３３Ｉｓｓ．１ ２０１６年１月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｊａｎ．２０１６ 一种含聚乙二醇非离子亲水基团的新型 水溶性荧光染料的合成及细胞成像 ａ，ｂ ａ ａ ａ ａ 王　升 　邱　娜 　张鹏超 　汤　昆 　张付利 ａ ｂ （河南大学 医学院环境医学研究所；药学院　河南 开封４７５００４） 摘　要　通过向吲哚环“Ｎ”位上引入一个含聚乙二醇（ＰＥＧ）醚链的非离子亲水基团，合成了一种新型水溶性 １ 不对称五甲川吲哚菁染料。用核磁（ＨＮＭＲ）和高分辨质谱（ＨＲＭＳ）表征染料的结构，测试了染料的光谱性 能，标记牛血清白蛋白（ＢＳＡ），并对固定细胞和活细胞分别染色。结果表明，该染料在水中的最大紫外吸收波 长和荧光发射波长分别为６４８和６６８ｎｍ，斯托克斯（ｓｔｏｋｅｓ）位移为２０ｎｍ，荧光量子产率（ ）为０１３，以碘钨 Ф 灯为光源光照８ｈ后，染料光降解率为５８％。用染料的ＮＨＳ活性酯标记牛血清白蛋白，标示率（Ｄ／Ｐ）为 １１６。对固定细胞染色发现，染料可对细胞整体着色，对细胞核染色最明显，能清晰看到核仁。对活细胞染色 发现，有少量染料跨膜进入细胞内部，对细胞质和细胞核有微弱染色，但在活细胞膜上聚集明显。 关键词　聚乙二醇醚链；非离子亲水基团；五甲川菁染料；荧光；细胞成像 中图分类号：Ｏ６２１　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１６）０１００３２０７ ＤＯＩ：１０．１１９４４／ｊ．ｉｓｓｎ．１００００５１８．２０１６．０１．１５０２５２ ［１］ ２０世纪９０年代，美国ＷａｇｇｏｎｅｒＡ．Ｓ．等 率先合成了发射波长在近红外区的一系列水溶性３Ｈ吲 哚菁染料 ，这类染料具有发射波长在近红外区，摩尔消光系数大、荧光性能良好、最大吸收波长可调谐 ［２］ 范围大，与蛋白质或核酸等结合后荧光量子产率增大等优点，被广泛应用在ＤＮＡ荧光探针 、生物大分 ［３］ ［４］ ［５］ 子荧光标记 、ｐＨ探针 以及动物活体成像 等生物学领域。近年来，吲哚菁染料在生物学上的应用 取得了丰硕成果，Ｃｙ５系列已经成为新一代商品化的生物荧光探针，其应用涉及到蛋白组学、基因芯片 及光动力疗法［６］治疗肿瘤等生物医学领域。但Ｃｙ５吲哚菁染料存在分离提纯困难、光稳定性差、信噪比 ［７］ 低以及因染料水溶性差导致染料分子聚集引起的荧光自淬灭等缺点，使其应用受到很大限制 。在吲 哚菁染料分子中引入一些功能性基团，是得到性能更为优良的Ｃｙ５的优良举措。我们通过向吲哚菁染 料分子中两个吲哚环“Ｎ”位上分别引入一个含ＰＥＧ醚链的大体积非离子亲水基团和羧戊烷基链，合成 了一种新型水溶性不对称五甲川吲哚菁染料。合成路线如Ｓｃｈｅｍｅ１所示。 ２０１５０７１７收稿，２０１５０８１３修回，２０１５０９２５接受 国家自然科学基金资助项目（ 通讯联系人：张付利，教授；Ｔｅｌ／Ｆａｘ：０３７１Ｅｍａｉｌ：ｈｄｚｆｌ５０８＠１６３．ｃｏｍ；研究方向：有机合成 共同通讯联系人：汤昆，讲师；Ｔｅｌ／Ｆａｘ：０３７１Ｅｍａｉｌ：