体外树突状细胞通过NT-3上调P-ERK12的表达促进神经干祖细胞分化.PDFVIP

第３４卷第２３期 第　三　军　医　大　学　学　报 Ｖｏｌ．３４，Ｎｏ．２３ ２３６８ ２０１２年１２月１５日　　　　　　　　　　 Ｊ　Ｔｈｉｒｄ　Ｍｉｌ　Ｍｅｄ　Ｕｎｉｖ 　　　　　　　　　　 Ｄｅｃ．１５　２０１２ 论著 文章编号：１０００５４０４（２０１２）２３２３６８０５ 体外树突状细胞通过ＮＴ３上调ＰＥＲＫ１／２的表达促进神经干／祖细胞分化 １ １ １ １ ２ １ 陈太邦 ，赵建华 ，王永飞 ，王　钟 ，郭乔楠 　　（４０００４２重庆，第三军医大学大坪医院野战外科研究所脊柱外科 ；４０００３８ ２ 重庆，第三军医大学西南医院病理学研究所 ） 　　［摘要］　目的　观察树突状细胞（ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓ，ＤＣｓ）对神经干／祖细胞（ｎｅｕｒａｌｓｔｅｍ／ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌｌｓ，ＮＳＰＣｓ）分化的 影响，探讨神经营养素３（Ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｎ３，ＮＴ３）在ＤＣｓ调控 ＮＳＰＣｓ分化中可能的作用机制。方法　 实验共设５组，分别 为ＮＳＰＣｓ组、ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ组、ＮＳＰＣｓ＋ＮＴ３组、ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ＋抗ＮＴ３组和ＤＣｓ组。共培养２４、４８、７２ｈ后，ＥＬＩＳＡ法检测各 组上清液中ＮＴ３含量；７ｄ后荧光免疫细胞化学法检测各组ＮＳＰＣｓ分化情况。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测各组ＮＳＰＣｓ磷酸化的细 胞外调节蛋白激酶（ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｒｅｇｕｌａｔｅｄｐｒｏｔｅｉｎｋｉｎａｓｅｓ，ＥＲＫ１／２）表达。结果　 ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ组上清液中ＮＴ３含量较 ＮＳＰＣｓ组、ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ＋抗ＮＴ３组和ＤＣｓ显著升高（Ｐ＜０．０５）。ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ组和ＮＳＰＣｓ＋ＮＴ３组 ｔｕｂｕｌｉｎ 阳性细胞 β Ⅲ 数较ＮＳＰＣｓ组和ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ＋抗ＮＴ３组显著增高（Ｐ＜０．０５），而ＮＳＰＣｓ组和ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ＋抗ＮＴ３组ＧＦＡＰ阳性细胞较 ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ组和ＮＳＰＣｓ＋ＮＴ３组显著增高（Ｐ＜０．０５）。ＮＳＰＣｓ／ＤＣｓ组和ＮＳＰＣｓ＋ＮＴ３组 ＮＳＰＣｓ中的ｐＥＲＫ１／２的表达 较其余两组增高（Ｐ＜０．０５）。结论　 ＮＳＰＣｓ与ＤＣｓ共培养能显著促进ＮＳＰＣｓ分化为神经元，可能与共培养后ＮＴ３表达 量增高，通过其特异性受体ＴｒｋＣ激活下游信号通路ＭＥＫＥＲＫ有关。 　　［关键词］　 干细胞；树突状细胞；共培养；分化；ＮＴ３ 　　［中图法分类号］　Ｒ３２９．２６；Ｒ３２９．２８；Ｒ３３８．１２　　 ［文献标志码］　Ａ Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓｐｒｏｍｏｔｅｎｅｕｒａｌｓｔｅｍ／ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｃｅｌｌｓｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈＮＴ３ ｕｐｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｐＥＲＫ１／２ｉｎｖｉｔｒｏ １ １ １ １ ２ １ ＣｈｅｎＴａｉｂａｎｇ，ＺｈａｏＪｉａｎｈｕａ，ＷａｎｇＹｏｎｇｆｅｉ，ＷａｎｇＺｈｏｎｇ，ＧｕｏＱｉａｏｎａｎ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＳｐｉｎａｌＳｕｒｇｅｒｙ，Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆ ２ ＳｕｒｇｅｒｙＲｅｓｅａｒｃｈ，ＤａｐｉｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ，ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，４０００４２；ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＰａｔｈｏｌｏｇｙ，ＳｏｕｔｈｗｅｓｔＨｏｓｐｉｔａｌ， ＴｈｉｒｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ，４０００３８，Ｃｈ