西兰花种子中硫苷酶解产物萝卜硫素提纯与抗肿瘤体外试验研究沈莲清.pdfVIP

第 卷 第 期 中 国 食 品 学 报 8 5 Vol． 8 No． 5 年 月 2 0 0 8 10 Journal of Chinese Institute of Food Science and Technology Oct． 2 0 0 8 西兰花种子中硫苷酶解产物萝卜硫素的提纯 与抗肿瘤的体外试验研究 沈莲清 苏光耀 王奎武 （浙江工商大学食品与生物工程学院 杭州 310035 ） 摘要 为了得到足够量纯度较高的萝卜硫素（用于抗肿瘤的体外试验）， 以丙酮为溶剂，从硫苷酶解产物中超声 提取萝卜硫素粗样，再依次通过正相硅胶柱与 Sephadex LH-20 凝胶柱分离提纯，得到萝卜硫素。 经HPLC 测 定，萝卜硫素的纯度为（80.4±2.8 ）% 。 采用体外细胞筛选试验研究萝卜硫素的抗肿瘤活性，试验结果显示，萝卜 硫素对 种肿瘤细胞株（ 、 、 、 及 细胞）均有显著的体外增殖抑制活性。本文为大规模从 5 HeLa HL-60 CNE PC3 P388 西兰花种子中分离提纯萝卜硫素打下基础，也为进一步开发抗癌新药提供科学依据。 关键词 西兰花种子 萝卜硫素 分离提纯 抗肿瘤活性 文章编号 （ ） 1009-7848 2008 05-0015-07 西兰花（Broccoli ）又名绿菜花、青花菜、嫩茎 后用高效液相色谱、 气相色谱与质谱等分析方法 花椰菜等，属十字花科芸薹属甘蓝种的一个变种， 对其进行纯度鉴定。 近年来，癌症的发病率及死亡 [1] [2] 为一二年生草本植物，原产于意大利 。 Merete 对 率逐年上升， 目前国际上对从植物中分离出来的 Marathon 西兰花的研究发现， 西兰花虽然不是总 硫代葡萄糖苷类物质及其降解产物异硫代氰酸盐 [9～10] 硫代葡萄糖苷含量最高的蔬菜， 但是其硫代葡萄 的防癌和抗癌研究非常热门 。 为了探索硫苷酶 糖苷含量也很高，其中以 甲基亚磺酰基丁烯基 解产物中萝卜硫素的简便、低毒的提纯方法，本文 4- 硫代葡萄糖苷（ ）和 甲基亚磺酰基 以丙酮为溶剂， 从硫苷酶解产物中超声提取萝卜 Glucoraphanin 3- 丙烯基硫代葡萄糖苷（Glucoiberin ）为主。硫代葡萄 硫素粗样，经正相硅胶柱与Sephadex LH-20 凝胶 糖苷是一种较稳定的化合物， 但其可被芥子酶 柱分离纯化到一定纯度的萝卜硫素样品。 此外采 （myrosinase ） 或胃肠道中细菌酶降解生成异硫代 用体外细胞筛选试验研究萝卜硫素的抗肿瘤活 氰酸盐、硫代氰酸盐、腈类化合物、嚅唑烷硫酮等 性，为进一步开发抗癌新药提供科学依据。 [3～4] 酶解产物 。 西兰花种子中硫苷的酶解产物异硫 代氰酸盐主要为萝卜硫素（ 异硫氰酸 甲磺酰 1- -4- 1 材料与方法