灭菌用生物指示剂指导原则（新增）.PDF

第一次征求意见稿 灭菌用生物指示剂指导原则 （新增） 生物指示剂是一种对特定灭菌程序有确定及稳定的耐受性的特殊微生物制 成品，可用于灭菌设备的性能确认、特定物品的灭菌工艺研发及建立、产品灭菌 程序的验证、生产过程灭菌效果的监控、灭菌程序的定期再验证、隔离器和无菌 洁净室灭菌效果的验证评估等。 生物指示剂的分类 生物指示剂主要有以下三种类型，其特征需符合《医疗保健产品灭菌生物 指示物》GB18281-的要求。 （1）由微生物芽胞和载体经包装而成，载体可以是碟形或条状的滤纸、玻 璃、塑料或其它材料。 载体和内层包装不得含有物理、化学或微生物的污染物，避免影响生物指示 剂的性能和稳定性；不得被特定的灭菌工艺降解；能被灭菌介质（蒸汽、射线、 化学试剂、过滤等）穿透并使灭菌介质与生物指示剂能充分接触。载体和包装的 设计应保证生物指示剂不受污染、并使其所含的微生物在贮存、运输和使用过程 中损失最小，且方便取样、转移和接种。 （2）芽胞悬液生物指示剂，该类生物指示剂是将芽胞混悬于液体中。若用 于液体物品灭菌，建议测定生物指示剂在灭菌液体物品中的芽胞数、D 值和 Z 值。 （3）自含式生物指示剂，该类生物指示剂是由芽孢和能够恢复微生物生长 的培养基组成的系统。系统中的培养基用于培养灭菌后的生物指示剂，应制定程 序确认该培养基能保证残存微生物的生长。 自含式生物指示剂的耐受性是针对整个系统而言。 自含式系统所采用的材料不应该含有或在使用过程释放出抑制残存微生物 生长的物质。该系统的设计应能够承受运输和使用过程中的影响，不发生破损， 并使原始接种的微生物损失减少到最小。 生物指示剂用微生物的基本要求 生物指示剂含有对灭菌模式有明确耐受性的一种或两种微生物。除了电离辐 射外，微生物芽孢较菌体有更强的耐受性。一般认为含芽胞的细菌更适合用于制 备生物指示剂。 第一次征求意见稿 不同灭菌工艺使用不同的生物指示剂，制备生物指示剂所选用的 微生物应具备以下特征： （1） 菌种的耐受性应大于需灭菌物品中所有可能污染菌的耐受性。 （2） 菌种应无致病性。 （3） 菌株应稳定，存活期长，易于保存。 （4） 易于培养。生物指示剂的芽胞含量要在 90%以上 生物指示剂的制备 生物指示剂应按程序进行制备和质控。制备前，需先确定所使用微生物的特 性。 制备生物指示剂时，将所用的微生物在适宜条件下进行大规模培养、收集和 纯化，然后将休眠（未萌发状态）芽胞悬浮于无营养的液体中保存。生物指示剂 应避免其它微生物的污染，制备后需进行各性能参数测定。应建立和保存相关的 微生物鉴定和制备记录，包括菌株来源，鉴别，与生物指示剂直接相关的材料和 成分的溯源记录，传代次数，培养基和其制备方法，以及热处理前后数据，芽胞 的耐受性（D 值和 Z 值）等信息。 商品化的生物指示剂应具备详细的生物指示剂的性能特征和使用说明，包括 明确其可用于何种灭菌程序、灭菌后的微生物培养条件和培养基、对灭菌程序的 耐受性包括 D 值，D 值测定方法、效期内的微生物总数和耐受稳定性，以及储存 条件（包括温度，相对湿度和其它储存要求）、有效期和使用后的废弃措施等信 息。 用户亦可根据需求选择可作为生物指示剂的微生物自制供内部使用的生物 指示剂。用户应确定自制生物指示剂的纯度、芽胞数、D 值等参数，并制定有效 期，以保证灭菌验证和监控的有效性。 生物指示剂应在标签条件或验证条件下进行储存，避光，远离毒性物质，防 止过热和潮湿。 生物指示剂的应用 生物指示剂的性能评估 在灭菌程序的验证中，生物指示剂的被杀灭程度，是评价一个灭菌程序有效 性最直观的指标。 第一次征求意见稿 用户应根据使用目的制定商品化生物指示剂的验收标准