王镜岩后生化课件4酶2.pptVIP

4.7.4 可逆的酶抑制剂常用于酶学研究和临床 临床上通过改变酶活性可以提供非常有效的治疗手段。在癌症和微生物或病毒感染中，药物治疗的目的是在不伤害宿主细胞的条件下防止受侵害细胞或病毒的繁殖。例如通过抑制病毒DNA合成所需要的酶就可使病毒感染减轻。 核苷3ˊ-叠氮-2ˊ,3ˊ-脱氧胸腺嘧啶（AZT,）是第一个用于治疗获得性免疫缺陷综合症（AIDS）的药物，它通过代谢可转换为相应的AZT 5ˊ-三磷酸，该三磷酸化合物抑制催化由病毒RNA模板合成DNA的逆转录酶。 氨甲蝶呤和三甲氧苄二氨嘧啶都是二氢叶酸还原酶的竞争性抑制剂，该酶是胸腺嘧啶单磷酸（TMP）合成所必需的酶。 氨甲蝶呤可以抑制脊椎动物二氢叶酸还原酶和被用于选择性杀伤快速分裂的细胞，是最成功的癌症化疗制剂之一。 三甲氧苄二氨嘧啶是原核生物二氢叶酸还原酶的一个有潜力的选择性抑制剂，但对人的还原酶的抑制很弱，所以常被用于某些细菌感染和疟疾的治疗。 另外，磺胺药是以对氨基苯磺酰胺为主要成分的消炎药（杀菌药），它的结构非常类似于细菌生长繁殖所需要的叶酸中对氨基苯甲酸，叶酸在二氢叶酸合成酶的催化下生成二氢叶酸，所以磺胺药与叶酸竞争结合二氢叶酸合成酶，因此磺胺药是细菌二氢叶酸合成酶的竞争性抑制剂。 人由于可以直接从食物中获得叶酸，所以基本上不受磺胺药。但细菌不能利用外源的叶酸。 磺胺药中的主要成分 叶 酸 4.8 不可逆抑制剂共价修饰酶 不可逆抑制抑制剂与酶分子形成一个稳定的共价键。有机磷化合物、有机汞、有机砷化合物、氰化物等都是酶的不可逆抑制剂。有机磷化合物可以使以可反应的丝氨酸为活性部位残基的水解酶失活。 神经毒气二异丙基氟磷酸（DFP）是有机磷化合物中的一员。DFP与酶活性部位的丝氨酸残基反应生成二异丙基磷酰丝氨酸。神经毒气对神经极端有毒，生物学上的作用抑制乙酰胆碱酯酶，使乙酰胆碱不能分解为乙酸和胆碱，乙酰胆碱的堆积引起一系列神经中毒症状，所以也称为神经毒剂。 二异丙基氟磷酸（DFP）与酶活性部位的丝氨酸残基反应生成二异丙基磷酰丝氨酸。两者之间形成的是共价健。 低浓度的吡啶醛肟甲碘化物（PAM）可以作为解毒药取代磷酸和重新激活取代的酶。 因为带正电荷的甲基吡啶基团可以与乙酰胆碱酯酶的阴离子部位结合，取代靠近有机酯的磷原子的亲核氧，使酶恢复活性。 4.9 酶促反应的速度受pH的影响 反应的起始速度对pH作图，大多数情况下可得到一个钟形曲线，例如葡萄糖-6-磷酸酶。有的酶温度曲线不是钟形，例如胃蛋白酶是个偏向酸性区的半钟形曲线。从曲线可以看出，在某一pH下，反应速度可达到最大，这一pH称为酶的最适pH。 葡萄糖-6-磷酸酶 胃蛋白酶 钟形曲线 半钟形曲线 丝氨酸蛋白酶家族活性部位中都含有丝氨酸残基，包括凝血因子和胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和弹性蛋白酶等消化酶。 细胞合成的是蛋白酶的非活性前体－酶原，必须经过共价修饰才能具有活性。 肠胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原、弹性蛋白酶原和羧肽酶原在合适的生理条件下，于细胞外通过有选择地水解一个或几个肽键后被激活。 4.10 丝氨酸蛋白酶可以说明酶活性的许多特征 4.10.1 胰凝乳蛋白酶原是胰凝乳蛋白酶的非活性前体 胰凝乳蛋白酶原的激活首先是在胰蛋白酶的催化下，Arg-15和Ile-16之间的肽键被切断，生成一个具有很高活性的，但相当不稳定的称为?-胰凝乳蛋白酶。 ?-胰凝乳蛋白酶的氨基酸残基第13和14、146和147以及148和149之间的肽键易于被活性的胰凝乳蛋白酶切割，称为自动激活作用，切下了Ser-14－Arg-15和Thr-147－Asn-148两个二肽，最后生成了最稳定形式的酶，即?-胰凝乳蛋白酶，或简称为胰凝乳蛋白酶。 胰凝乳蛋白酶是含有241个氨基酸残基的由3条链组成的蛋白酶。胰凝乳蛋白酶的三级结构是通过连接残基1和122、42和58、136和201、168和182以及191和220的5个二硫键稳定的。 胰凝乳蛋白酶原的激活过程 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 ?-胰凝乳 蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 4.10.2 凝血涉及酶原激活的级联反应 凝血涉及十多种蛋白，其中某些蛋白质是以非活性的丝氨酸蛋白酶原形式在血液中循环。当血管损伤时，凝血酶原通过级联反应的方式被快速地激活。每