浙江高考生物一轮复习第32讲基因工程课件.pptxVIP

知识内容展示;考点　基因工程;解析　目的基因和载体用同种限制性核酸内切酶酶切，在切口处形成相同的粘性末端，用DNA连接酶连接后，在两个片段相连处形成磷酸二酯键，从而获得重组质粒；用CaCl2处理农杆菌，可增加细菌细胞壁的通透性，使重组质粒进入农杆菌，使农杆菌发生转化，在离心管中加入液体培养基，置于摇床慢速培养一段时间，使农杆菌恢复细胞的正常状态并大量繁殖。 答案　（1）粘性末端　磷酸二酯键　（2）转化　　使CaCl2处理过的农杆菌恢复细胞的正常状态;2.（2016·浙江4月选考节选）兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答： 从兔肝细胞中提取mRNA，在　　　　酶的作用下形成互补DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形???　　　　，再导入用氯化钙处理的　　　　，侵染矮牵牛叶片。 解析　mRNA在逆转录酶的作用下形成互补DNA。将基因E与Ti质粒连接在一起，形成重组DNA分子。重组DNA分子可导入用氯化钙处理的农杆菌细胞，再用处理的农杆菌侵染矮牵牛叶片，从而使基因E整合到矮牵牛细胞的染色体DNA上。 答案　逆转录　重组DNA分子（重组质粒）　农杆菌;本题组对应选修三P1～P12，基因工程; （2）DNA连接酶 作用：将具有相同 的两个DNA片段连接在一起，形成 。 （3）载体 ①常用载体－质粒：在细菌中独立于 之外，为 DNA分子，能 ，常含有特殊的 作为标记基因，以供目的基因筛选。 ②其他载体：噬菌体、 等。;2.受体细胞与导入方法;1.基因工程 （1）广义概念：把一种生物的 （细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另外一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中 。 （2）核心：构建 。 （3）基因工程原理：基因重组。 （4）理论基础： 是生物遗传物质的发现，DNA双螺旋结构的确立以及遗传信息传递方式的认定。 （5）技术保障： 、DNA连接酶和质粒载体的发现和运用。;2.基因工程的基本操作步骤;农杆菌转化法;3.基因工程中的几种检测方法;4.基因工程的应用 （1）用于遗传育种：定向变异， 强；克服远缘杂交 的障碍。 （2）用于疾病治疗： ①生产基因工程 ，如胰岛素、乙肝疫苗等。 ②基因治疗：向目标细胞中引入 的基因， 或 基因缺陷，达到治疗的目的。如对B型血友病治疗获得成功。 （3）用于生态环境保护;角度1　基因工程工具 1.如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（　　）;解析　限制性核酸内切酶可在特定位点对DNA分子进行切割，①为限制性核酸内切酶；DNA聚合酶在DNA分子复制时将脱氧核苷酸连接成脱氧核苷酸链，④为DNA聚合酶；DNA连接酶可将限制性核酸内切酶切开的磷酸二酯键连接在一起，②为DNA连接酶；解旋酶的作用是将DNA双链解开螺旋，为复制提供模板，③为解旋酶。 答案　C;2.（2018·温州模拟节选）利用图示质粒和目的基因培育转基因醋化醋杆菌。图中标注了相关限制性核酸内切酶的识别序列和酶切位点，其中酶切位点相同的酶不重复标注。;利用图示质粒和目的基因构建重组质粒，应选用　　　　 和　　　　两种限制酶切割。若用Sau3AⅠ与许多图示质粒混合，每个质粒将会有1个或多个位点被切开，最多可能获得　　　　种大小不同的DNA片段。 解析　Bcl Ⅰ使质粒中的两个标记基因均被破坏，因此只能选BamH I和HindⅢ两种限制酶切割；根据BamHⅠ、BclⅠ和Sau3AⅠ的识别序列，Sau3AⅠ在质粒上有三个酶切位点，完全酶切可得到记为A、B、C三种片段，若部分位点被切开，可得到AB、AC、BC、ABC四种片段，所以用Sau3AⅠ切图示质粒最多可能获得7种大小不同的DNA片段。 答案　BamH Ⅰ　HindⅢ　7;（2）切割后产生末端的种类——粘性末端和平末端：当限制性核酸内切酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是粘性末端，而当限制性核酸内切酶在它识别序列的中轴线处切开时，产生的是平末端。;3.与DNA有关的酶的比较;角度2　基因工程原理和技术、应用 3.为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。;下列操作与实验目的不符的是（　　） A.用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和DNA连接酶构建重组质粒 B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞 C.在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞 D