第七章好线粒体.pptVIP

◆标志酶:单胺氧化酶 ◆外膜含有较大的通道蛋白:孔蛋白 最大允许5000D的分子自由通过 ◆标志酶:腺苷酸激酶 ◆功能:建立电化学梯度 ◆蛋白质的两种运输方式 ●翻译后转运 (post-translational translocation) ●共翻译转运 (co-translational translocation) ?前导肽与信号肽 ◆前导肽(leading peptide) 导向序列(targeting sequence)、导向信号(targeting signal)、转运肽(transit peptide) ◆信号肽(signal peptide) 信号序列（signal sequence） ◆前导肽的结构特点 ●长约20-80个氨基酸，通常带正电荷的碱性氨基酸(特别是精氨酸和赖氨酸)含量较为丰富; ●序列中不含有或基本不含有带负电荷的酸性氨基酸，并且有形成两性(既亲水又疏水)α螺旋的倾向。 ◆如何证明前导肽引导蛋白质 进入线粒体? ◆实验设计 ●无细胞体系中合成酵母线粒体蛋白 ●一组直接加入胰蛋白酶处理 ●另一组加入线粒体后，再用胰蛋白酶处理 7.3.2 线粒体蛋白定位 ◆线粒体基质蛋白定位 ◆线粒体膜间隙蛋白的定位 ◆线粒体内膜蛋白的定位 ◆线粒体外膜蛋白的定位 ?外膜蛋白与内膜蛋白的定位 只需要一个引导肽引导外膜与内膜蛋白穿膜。由于引导肽后有一段疏水的停止转移序列，所以会停止跨膜。 若停止转移序列与外膜转运酶结合，则为外膜蛋白；与内膜转运酶结合，则为内膜蛋白。 7.4 线粒体的功能:氧化磷酸化作用 ?葡萄糖酵解生成丙酮酸 细胞质中的葡萄糖(或糖原)在一 系列酶的催化下生成丙酮酸的过程成 为糖酵解(glycolysis)。 ?线粒体基质中乙酰辅酶A的生成 ◆丙酮酸跨膜进入线粒体基质； ◆在丙酮酸脱氢酶(pyruvate dehydrogenase) 作用下氧化成乙酰辅酶A。 ●生物需要能量时首先利用多糖; ●必要时也会利用脂肪: ▲脂肪被水解生成脂肪酸; ▲脂肪酸能够进入线粒体基质，通过β氧化途径(β-oxidation pathway)循环氧化生成乙酰辅酶A。 ?三羧酸循环 (tricarboxylic acid cycle, TCA) 又叫Krebs循环、柠檬酸循环。 7.4.2 呼吸链与电子传递 ?线粒体能量转换策略 ◆三羧酸循环中的能量转换-高能电子中蕴藏着巨大能量 NAD+ → NADH 自由能增加 FAD+ → FADH2 自由能增加 ◆NADH和FADH2必须被氧化才能维持三羧酸循环 NADH + 1/2 O2 → NAD+ + H2O + 能量 FADH2 + 1/2 O2 → FAD+ + H2O + 能量 ◆NADH和FADH2被氧化时释放的H+、电子和能量如何安置? ?呼吸链(respiratory chain) ◆又称电子传递链 ◆功能是参与对还原型辅酶的氧化 ●H+的传递 ●电子传递 ?递电子体与递氢体 ◆递电子体：复合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、辅酶Q和细胞色素c ◆递氢体：复合物Ⅰ（质子泵）、Ⅲ （质子泵） 、Ⅳ（质子泵）和辅酶Q ?Types of Electron Carriers ◆黄素蛋白(Flavoproteins) ◆细胞色素(Cytochromes) ◆铜原子(Copper atoms) ◆泛醌(Ubiquinone) ◆铁硫蛋白(Iron-sulfur proteins) ?主次电子传递链 ◆主呼吸链∶ 复合物Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ构成主呼吸链，从NADH来的电子依次经过这三个复合物, 进行传递。 ◆次呼吸链∶ 复合物Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ构成次呼吸链，来自FADH2的电子不经过Ⅰ。 7.4.3 电子传递与氧化磷酸化 ◆Oxidative phosphorylation 活细胞中伴随着呼吸链的氧化作用所发生的能量转换和ATP的形成过程。 ?线粒体内膜电化学梯度的建立 ◆电化学梯度（Electrochemical gradient ） ●质子梯度 ●内膜两侧电位差 ◆proton-motive force(质子动势) ◆结构 ●Head section:即F1，由5种多肽组成九聚体(α3β3γδε)，3个β亚基各有1个催化ATP合成的位点。 ●Stalk section:由F1的γ亚基和ε亚基构成，γ亚基穿过头部作为头部旋转的轴。 ●Membrane section:即FO，由3种不同的亚基组成的十五聚体(1a∶2b∶12c)。 c亚基: b亚基: a亚基: ?The Mechanism of Oxidative Phosphorylatio