专题2课题1微生物实验室培养.pptVIP

阅读课本P17，思考与讨论倒平板操作后面的四个问题。 练习 1.不能作为异养微生物碳源的是（ ） A．牛肉膏　 B．含碳有机物 C．石油　　 D．含碳无机物 2.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是（ ） 　A．碳源　　B．氮源 　C．无机盐　D．生长因子 2.稀释涂布平板法 ①菌液的梯度稀释： ②涂布平板操作： (1)概念与原理： 聚集的微生物 单个细胞 菌液梯度稀释 菌落 涂布平板 (2)操作： 生长繁殖 ①系列梯度稀释操作 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 9mL无菌水 注意：移液管需要经过灭菌；试管口和移液管离火焰1～2cm处。 ②涂布平板操作： (1)涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作？ 答：应从操作的各个细节保证“无菌”。 例如:①酒精灯与培养皿的距离要合适 ②吸管头不要接触任何其他物体 ③吸管要在酒精灯火焰周围等等 各梯度分别涂布3个平板 1个不涂布作空白对照 稀释103倍 稀释104倍 稀释105倍 放入37℃恒温箱中培养12h～24h （3）培养 1.未接种的培养基表面是否有菌落生长？如果有菌落生长，说明了什么？ 未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。 2.在接种大肠杆菌的培养基上，能否观察到独立的菌落？它们的大小、形状、颜色相似吗？ 如果接种成功的话，在培养基的表面可观察到大小、形状、颜色相似的菌落。 三、结果分析与评价 3.培养12h和24h后，观察到的实验结果相同吗？如果不同，请分析产生差异的原因？ 培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同。随着时间的延长、菌落的不断生长，使菌落不断增大。 4.如果在培养基上观察到不同形态的菌落，请分析其可能的原因。 无菌操作未达到要求：可能是培养基灭菌不彻底；可能是接种时发生了污染；也可能是在培养的过程中受到了污染。 1.临时保藏： 试管固体斜面培养基上 4℃ 2.长期保存： 菌种易被污染、变异 甘油管藏 1ml甘油＋1ml菌液 －20℃ 四 菌种的保存 3～6个月，转移培养 D A * 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。 一、课题目标： 掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。 无菌技术的操作。 二、课题重点和难点： 三、技能目标： 课题背景 微生物研究和应用的前提： 如何获得纯净培养物？ 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 ①提供合适的营养和环境条件 ②确保其他微生物无法混入 一、培养基作用、种类 二、无菌技术 三、制备牛肉膏蛋白胨培养基 四、纯化大肠杆菌 主要内容 一 基础知识 1.概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。 2.类型： 按物理性质划分： 按化学成分划分： 按用途划分： （一）培养基 固体培养基 液体培养基 有 无 凝固剂琼脂 分离 鉴定 工业 生产 （1）按物理性质划分： 天然培养基 合成培养基: （2）按化学成分划分： 按照需要的成分进行配置。 （3）按用途划分： 选择培养基: 鉴别培养基: 加入某种化学物质，从众多微 生物中分离出所需微生物。 加入某种试剂，鉴别不同种类的微生物。 加入青霉素的培养基: 不加氮源的无氮培养基: 不加含碳有机物的无碳培养基: 几种选择培养基举例： 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 唯一碳源为纤维素的培养基 分解纤维素的细菌 3.基本成分： 碳源、氮源、水、无机盐 ⑴碳源 无机碳源： 有机碳源： CO2、CO32-、HCO3- 牛肉膏、蛋白胨等 自养微生物 异养微生物 ⑵氮源 无机氮源： 有机氮源： NH4＋、NO3- 牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等 注：含C、H、O、N的有机物是异养型微生物的碳源、氮源、能源 （二）无菌技术 防止外来杂菌的污染. 1.哪里需要无菌？ 2.如何控制无菌？ 无菌的意义： （1）实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 （2）培养的器皿、接种用