树鼩原代皮肤成纤维细胞的分离培养技术.PDFVIP

动物学杂志 Chinese Journal of Zoology 2019, 54(1): 76 ~ 86 树鼩原代皮肤成纤维细胞的分离培养技术 ① ①# ① ② ② ① 白剑 焦玲帅 杨铭 王武 代解杰 夏雪山 ① 昆明理工大学生命科学与技术学院 昆明 650500 ；② 中国医学科学院/北京协和医学院医学生物学研究所 树鼩标准化研究与疾病动物模型省创新团队 昆明 650118 摘要：建立稳定的树鼩（Tupaia belangeri）皮肤成纤维细胞的体外培养体系，可为有关此类细胞的实 验和疾病树鼩细胞模型提供技术支持。取树鼩大腿内侧皮肤用组织块贴壁法和胶原酶 Ⅰ消化法分离皮 肤细胞，胰蛋白酶差别消化法纯化细胞；用MEM （10% FBS）完全培养基和含低血清生长添加物（LSGS ） 的培养基培养细胞；免疫荧光和蛋白印迹法鉴定细胞，并测定细胞的生长、冻存和复苏特性。经树鼩 皮肤细胞分离效果比较，胶原酶消化法比组织块贴壁法更适合用于树鼩原