westernb浩lot试剂的准备.docVIP

Western Blot试剂的准备 1. 30%储备胶溶液：丙烯酰胺（Acr）? ?? ?? ?? ? 29.0g　　　　　　　　　　　亚甲双丙烯酰胺（Bis）? ?? ???1.0g　混匀后ddH2O，37℃溶解，定容至100ml，棕色瓶存于室温。 2. 4×分离胶缓冲液（1mol/L Tris-HCl??PH 8.8）? ?Tris??18.17g加ddH2O溶解，浓盐酸调PH 8.8，定容至100ml。 3. 4×浓缩胶缓冲液（0.5mol/L Tris-HCl??PH 6. 8）? ? Tris??12.1g加ddH2O溶解，浓盐酸调PH 6. 8，定容至100ml。 4. 10%SDS：电泳级SDS 10.0g加ddH2O，68℃助溶，浓盐酸调PH 7.2，定容至100ml。 5. 5×电泳缓冲液（PH 8.3）：? ???Tris? ?? ? 15.2g? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?甘氨酸? ? 94g??? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?ddH2O? ???定容到1000ml? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?? ?SDS? ?? ? 5g　　先在974ml蒸馏水中加入Tris碱，待溶解完全后，再加甘氨酸，最后加SDS。 6. 10%过硫酸铵（AP）：0.1g?