三环苦参衍生物的设计、合成及抗柯萨奇病毒活性研究-微生物是与生化药学专业毕业论文.docx

北京协和医学院硕士学位论文 北京协和医学院硕士学位论文 摘要 摘要 槐果碱(苦参烯碱)是从豆科槐属植物中提取的喹诺里西啶类生物碱单体。作 为院内制剂，其注射液能有效对抗柯萨奇B3(CVB3)病毒，治疗病毒性心肌炎。 鉴于其独特的化学结构与生物活性，本课题组前期以苦参烯碱为先导物，将其内酰 胺环打开，结构简化为三元环，从而在其11位和12位侧链上引入多个可修饰位点。 获得全新结构的代表性化合物12_Ⅳ-3’．氰基苯磺酰苦参丁烷(DB．3)，抗CVB3的 IC50为1．26州，活性较先导物苦参烯碱提高了一千多倍，并具有广谱抗柯萨奇B 组病毒和药代性质良好的特点(FutureMedChem．，2016)。但是，口服给予DB-3 500 mg／kg时，小鼠出现明显的惊慌反应，存在一定的安全性缺陷。 苦参烯碱DB一3 IC5021354．9 uM IC50=1．26 uM 图1苦参烯碱和DB-3的结构、活性以及待修饰片断 本文上述工作基础上，以DB-3为先导物，抗CVB3活性为导向，继续针对其 结构中的12．Ⅳ取代基片断和1l位侧链开展系统的结构修饰与优化，一方面提高 DB-3的安全性，同时进一步完善了三环苦参类似物的构效关系(SAR)。共设计合 成了96个全新的结构化合物，总结如下(见图2)： 1．12．Ⅳ上各类取代基的活性排序为苯磺酰基≥苯甲酰基苄基脂肪酰，12-N上的 氰基或三氟甲基等强吸电子基团取代的苯(甲／磺)酰基为活性最有利基团。 2．将ll位丁烷侧链变换为丁胺、丁酸活性时，活性消失；变换为丁甲醚时活性保 持，而乙甲醚活性普遍降低，醚类化合物随着碳链的延长，活性提高。 3．在11位丁烷侧链的末端引入卤素原子CI，F活性保持，而将丁基侧链缩短为乙 基，Cl代烷活性提高，F代烷化合物的活性降低。 从中选取活性较好(IC5010 pM)、不同结构类型的15个化合物，包括DHC．1、 DB．1l、DB．1．03、DXC．9、DXC．10、DXC．17、CK．2、CK-3、CK-5、JM．2、CF-4、 CF．5、CF．6、CF．9、3408开展了小鼠急性毒性试验，其中DB．11、DB．1．03、JM．2、 CF-5、CF一6、CF一9共6个化合物的LDso500 mg／kg。据此我们总结了此类化合物 的构毒关系(STR)，总结如下(见图2)： 1．11位侧链为丁烷时，12-N取代基的毒性排序为：苯磺酰基杂芳香环磺酰基苯 甲酰基。 2．12-N取代基为苯磺酰时，11位侧链毒性以丁胺最小，其次依次以丁烷最小，其 万方数据 北京协和医学院硕士学位论文 北京协和医学院硕士学位论文 摘要 次依次为氟代丁烷、丁甲醚，氯代丁烷和氯代乙烷。 从活性和安全性较好的化合物库中选择了具有不同结构类型的四个化合物 DHC．1、DB．11、I)XC．9、DXC．10开展了广谱抗CVBl、CVB2、CVB4、CVB5、 CVB6和CVAl6活性测定，其IC50介于0．6~16．0 gM之间。结果表明，三环苦参衍 生物对普遍具有广谱抗柯萨奇病毒的活性。 药代动力学测试结果显示，大鼠按25 mg／kg剂量一次性口服DB．11、DXC．10， 最高血药浓度Cmax分别为2．8州·h和1．89M·h，最大达峰时间Tmax分别为1．3 h 和1．8 h，药时曲线下面积AUC0．t分别为28．1州·h和7．5州·h。这一结果说明DB．11 和DXC．10具有较好的成药性，具有进一步发展的前景。 抗CVB3活性 小鼠急性毒性 芳香环活性 吸电子基团 活性最佳 H2，CoOH 丁甲醚丁／乙氯 图2三环苦参衍生物抗CVB3的SAR和STR总图 本文累积合成了96个未见文献报道的目标化合物，结构均经1H NMR，13C NMR 和HRMS确证。其中36个化合物抗CVB3活性ICso10 gM，DB．11显示出广谱抗 CVB活性和良好的药代参数及安全性，IC50为1．58州。结果提示，三环苦参类衍 生物是一类全新结构骨架的抗CVB化合物，具有潜在应用前景，深入的作用机制 研究正在进行中。部分化合物已发表于《药学学报》(2016)。 此外，本论文还对目标化合物库开展了抗流感活性的普筛，其中DHC．13对甲 型A95．359活性IC50为10．8州，为抗流感提供了优秀的先导化合物，值得进一步 研究。 关键词：苦参烯碱；柯萨奇病毒B3；构效关系；构毒关系；抗流感 万方数据 AbstractS