紫外可见分光光度法的基本原理.ppt

样品的采集 1.采样步骤 样品通常可分为检样、原始样品和平均样品。采集样品的步骤一般分五步，依次如下。 (1)获得检样 ?由分析的整批物料的各个部分采集的少量物料成为检样。 (2)形成原始样品 ?许多份检验综合在一起称为原始样品。如果采得的检验互不一致，则不能把它们放在一起做成一份原始样品，而只能把质量相同的检样混在一起，作成若干份原始样品。 样品的采集 (3)得到平均样品 ?原始样品经过技术处理后，再抽取其中一部分供分析检验用的样品称为平均样品。 样品的采集 (4)平均样品三分 ?将平均样品平分为三份，分别作为检验样品(供分析检测使用)、复验样品(供复验使用)和保留样品(供备查或查用)。 (5)填写采样记录 ?采样记录要求详细填写采样的单位、地址、日期、样品的批号、采样的条件、采样时的包装情况、采样的数量、要求检验的项目以及采样人等资料。 2.采样的一般方法 采样通常有两种方法： 随机抽样和代表性取样。 (三)、检验样品的制备和保存 因为采样得到的样品数量不能全用于检验，必须再在样品中取少量样品进行检验。检验样品的制备可使用四分法。即将各个采集回来的样品进行充分混合均匀后，堆为一堆，从正中划“十”字，再将“十”字的对角两份分出来，混合均匀再从正中划“十”字，这样直至达到所需要的数量为止即为检验样品。 样品的处理 食品的组成是复杂的，在分析过程中各成分之间常常产生干扰；或者被测物质含量甚微，难以检出，因此在测定前需进行样品处理，以消除干扰成分或进行分离、浓缩。 样品处理过程中，既要排除干扰因素，又不能损失被测物质，而且使被测物质达到浓缩，以满足分析化验的要求，保证测定获得理想的结果，因此，样品处理在食品理化检验工作中占有重要的地位。 样品处理的目的有三个： 1.使被测成分转化为便于测定的状态； 2.消除共存成分在测定过程中的影响和干扰； 3.浓缩富集被测成分。 样品处理时按照食品的类型、性质、分析项目，采取不同的措施和方法，常用的方法有： 一、食品中的重金属检测 1、食品中检测的重金属通常包括:铅、锌、锰、铜、镉、铬、砷、镍等，这些元素及离子都能采用紫外-可见分光光度法检测。 GB 5009.12-2010 食品安全国家标准 食品中铅的测定 GB 5009.75-2014 食品安全国家标准 食品添加剂中铅的测定 GB 5009.11-2014 食品安全国家标准 食品中总砷及无机砷的测定 GB 5009.76-2014 食品安全国家标准 食品添加剂中砷的测定 二、食品中有机物检测 1、GB 5009.33-2016 食品安全国家标准 食品中亚硝酸盐与硝酸盐的测定 2、GB/T 18932.6-2002 蜂蜜中甘油含量的测定方法 紫外分光光度法 3、GB/T 23195-2008 蜂花粉中过氧化氢酶的测定方法 紫外分光光度法 4、SN/T 0857-2000 进出口啤酒中二氧化硫的检验方法 分光光度法 （6）最重要的引起偏离比耳定律的因素: (一） 由于非单色光引起的偏离 （二）? 由于溶液本身的化学和物理因素引起的偏离 （三）比尔定律只适用于稀溶液，是一个有限定条件的定律。在浓度高于0.01mol/L时，吸收组分间平均距离减小，电荷分布改变，?发生改变，吸收给定波长的能力改变。 一、 主 要 部 件 光源 单色器 样品室 检测器 显示器 紫外可见吸收光谱法 1. 光源 ——在整个紫外光区和/或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500nm 紫外光区：氢、氘灯，发射波长范围在185～400nm D2 灯 H2 灯 200 250 300 ?/nm 相对辐射功率 2.单色器 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 ——将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出任一波长单色光的光学系统。 3.样品室 ——又称吸收池——放置各种类型的比色皿和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫外区须采用石英池，可见区一般用玻璃池 4.检测器 ——利用光电效应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管（CCD）。 ——检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理 文件存储、峰形处理、对数或微积分函数运算、 5. 结果显示记录系统 二、分光光度计的类型 types of spectrometer 1. 单光束分光光度计——从光源到检测器只