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- 2019-01-18 发布于福建
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基因重组时方法=全
自然转化过程的特点: a)对核酸酶敏感; c)转化是否成功及转化效率的高低主要取决于转化(DNA) 给体菌株和转化受体菌株之间的亲源关系; d)通常情况下质粒的自然转化效率要低得多; 提高质粒的自然转化效率的二种方法: 1)使质粒形成多聚体,这样进入细胞后重新组合成有 活性的质粒的几率大大提高; 2)在质粒上插入受体菌染色体的部分片段,或将质粒转 化进含有与该质粒具有同源区段的质粒的受体菌-------重组获救 b)不需要活的DNA给体细胞; 噬菌体DNA被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒 转染(transfection): 现在把DNA转移至动物细胞的过程也称转染 提纯的噬菌体DNA以转化的(而非感染)途径进入细胞 并表达后产生完整的病毒颗粒。 特点: 接合 (conjugation): 细胞与细胞的直接接触(由F因子介导) 转导(transduction): 由噬菌体介导 自然遗传转化(natural genetic transformation): 游离DNA分子 + 感受态细胞 “接合” “转导” 及“自然转化”这三种在自然界中 存在的细菌遗传重组过程各自的特点: a)外源DNA的来源及进入途径有差异; b)决定因素也各有不同; (2)人工转化 用CaCl2处理细胞,电穿孔等是常用的人工转化手段。 在自然转化的基础上发展和建立的一项细菌基因重组
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