微生物工程重顺点内容.ppt

微生物工程的基本概念 利用微生物的特定性状和机能，通过现代化工程技术，生产有用物质或直接应用于工业化生产的技术体系；是将传统发酵与现代基因工程、细胞工程、代谢工程、生物信息工程和计算机控制等新技术结合并迅速发展起来的现代发酵技术。 微生物工程发展简史 1、传统的微生物发酵技术——天然发酵 2、第一代微生物发酵技术 ——纯培养技术 3、第二代微生物发酵技术——深层培养技术 4、第三代微生物发酵技术 ——代谢调控技术 5、第四代发酵技术——基因工程技术 微生物工程 微生物工程的组成 生物化学 微生物工程产品类型 初级代谢产物 与菌体生长相伴随的产物， 氨基酸、核苷酸、维生素、有机酸、溶剂 菌体对其合成反馈控制严密，一般不过量积累 次级代谢产物 与菌体生长不相伴随，以初级代谢产物为原料而合成 抗生素、生物碱、毒素、胞外多糖等 结构常较复杂对环境条件敏感 初级代谢产物primary metabolite 是指微生物通过代谢活动所产生的、自身生长和繁殖所必需的物质，如氨基酸、核苷酸、多糖、脂类、维生素等。通过初级代谢，能使营养物转化为结构物质、具生理活性物质或为生长提供能量，因此初级代谢产物，通常都是机体生存必不可少的物质，只要在这些物质的合成过程的某个环节上发生障碍，轻则引起生长停止，重则导致机体发生突变或死亡，是一种基本代谢类型。 次级代谢产物secondary metabolite 是指微生物生长到一定阶段才产生的化学结构十分复杂、对该生物无明显生理功能，或并非是微生物生长和繁殖所必需的物质，如抗生素、毒素、激素、色素等。不同种类的微生物所产生的次级代谢产物不相同，他们可能积累在细胞内，也可能排到外环境中。 4）微生物特殊机能的利用 利用微生物消除环境污染 利用微生物保持生态平衡 利用微生物探矿、冶金、石油脱硫等（氧化硫杆菌、排硫杆菌、脱氨硫杆菌、氧化亚铁硫杆菌（如芽孢杆菌属、土壤杆菌属）等。） 利用基因工程菌生产动、植物细胞产品 2、工业微生物种类 2.1 原核细胞类微生物:细菌、放线菌、立克次氏体、衣原体等 2. 2 真核细胞类微生物:酵母菌和霉菌，单细胞藻类、原生动物等 2.1 非细胞类微生物（主要作为基因工程的载体） :RNA病毒（逆转录病毒）DNA病毒（腺病毒） 3、微生物的特点 3.1 种类多 3.2 分布广 3.3 体积小 3.4 繁殖快 3.5 代谢强 3.6 易变异 硫酸镁： ? Mg 2+是许多重要酶（如己糖磷酸化酶、异柠檬酸脱氢酶、羧化酶等）的激活剂 ?镁离子能提高一些氨基糖苷类抗生素产生菌对自身所产的抗生素的耐受能力，如卡那霉素、链霉素、新生霉素等产生菌。 ?硫存在于细胞的蛋白质中，是含硫氨基酸的组成成分 ?硫是构成一些酶的活性基 ?硫酸镁加入培养基中，在碱性条件下会形成氢氧化镁沉淀，配料时要注意。 1）孢子培养基：供菌种繁殖孢子的培养基，常用固体培养基。 孢子培养基基本要求：基本要求是能使菌体迅速生长，产生较多优质孢子，且不易引起菌种发生变异。 配制时需注意 A）营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。B）所用无机盐的浓度要适量，否则会影响孢子量和孢子颜色。C）注意pH和培养基的湿度。 常用孢子培养基◆ 麸皮培养基 ◆ 小米培养基◆ 大米培养基 ◆ 玉米碎屑培养基◆ 用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制的琼脂斜面培养基 注意：大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少、疏松、表面积大，是良好的孢子培养基。 2）种子培养基：供孢子发芽、生长和菌体繁殖的培养基。 营养要求比较丰富和完全，氮源和维生素的含量也要高些，但总浓度以略稀薄为好，这样可达较高的溶解氧，供大量菌体生长和繁殖。 ? 种子培养基的成分要考虑在代谢过程中能维持稳定的pH，其成分还要根据不同菌种的主要特征而定。 3）发酵培养基：供菌体生长、繁殖和合成大量代谢产物用的培养基。 ? 要使种子接入后能迅速生长，达到一定的菌体浓度又要使长好的菌体能迅速合成所需产物。因此发酵培养基的组成除有菌体生长所必需的元素和化合物外，还要有合成产物所需的特定元素、前体和促进剂等。 ①基础培养基：是含有一般微生物生长繁殖所需的基本营养成分的培养基； ② 加富培养基：在基本培养基中加入某些特殊的营养物质，如血、血清、动植物组织液或其他营养物质（或生长因子）的一类营养丰富的培养基。 ③ 富集培养基：用来富集（使数量上占优势）和分离某种特定微生物或用以培养营养要求苛刻的微生物 . ④ 选择培养基：具体说，是加入相应的特殊营养物质或有抑菌性的化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长,而促进所需微生物的生长。用于将某种或某类微生物从混杂的微生物群