基于“精血髓一体论”探讨补血中药对vd大鼠海马ca1区gfap数目及缺血脑组织微血管密度的影响-神经内科专业论文.docxVIP

成都中医药大学 成都中医药大学 2015 届硕士学位论文 万方数据 万方数据 中文摘要 【目的】：本研究基于“精-血-髓一体论”，即一方面血可直接上行充养脑髓， 另一方面血能生精，精能生髓。实验研究以血管性痴呆与缺血组织微血管新生、 星形胶质细胞关系为切入点，采用血管性痴呆动物模型，从行为学、形态学、蛋 白组学技术，通过研究补血名方当归补血汤对模型大鼠的学习记忆能力、脑组织 形态学变化、海马 CA1 区 GFAP 数目的表达的影响，从而论释“精血髓一体论” 用于治疗血管性痴呆的现代生物学基础。 【方法】：以 SD 雄性大鼠为实验对象,采用改良 Pulsinelli 四血管阻断（4-vo） 法建立血管性痴呆动物模型。将 35 只大鼠造模后一周，观察模型大鼠行为表现 并进行神经功能缺损评分选出 20 只模型大鼠进行实验,实验分为假手术组（10 只）、VD 模型组（10 只）、VD 模型+当归补血汤组（10 只）、正常组（10 只）。造 模后药物干预 90 天,Morris 水迷宫试验检测各组大鼠行为学改变,HE 染色及光镜 观察脑组织形态学变化,免疫组化法检测第Ⅷ因子表达以观察缺血脑组织微血管 密度的改变,采用免疫荧光标记技术检测各组大鼠海马 CA1 区 GFAP（胶原纤维酸 性蛋白）数目。 【结果】1.形态学观察：VD 模型组海马较多星形胶质细胞增生，可见噬神经 现象，红色神经元（凋亡），VD 模型组+当归补血汤组海马较模型组星形胶质细 胞增生增多，可见噬神经现象，红色神经元（凋亡）。 2.Morris 水迷宫行为学测试结果：Morris 水迷宫实验逃避潜伏期时 间,VD 模型组大鼠明显延长,与假手术组相比有极显著差异(P0.01)。VD 模型组+ 当归补血汤组逃避潜伏期时间依次缩短,与 VD 模型组比较有极显著差(P0.01)， 正常组和假手术组逃避潜伏期时间比较无差异（P0.01）。 3.荧光显微镜下观察 GFAP 表达结果：VD 模型组大鼠海马 CA1 区 GFAP 表达的免疫荧光细胞较正常组及假手术组均明显增多（P0.05），而 VD 模型+当 归补血汤组大鼠海马 CA1 区 GFAP 表达的免疫荧光细胞较 VD 模型组显著增加，二 者比较，具有显著性差异（P0.05），正常组和假手术组比较无差异（P0.05）。 4.缺血脑组织微血管密度检测结果：缺血灶周围微血管密度方面,VD 模型组、VD 模型+当归补血汤组较假手术组依次升高；VD 模型组、VD 模型+当归 补血汤组与假手术组相比,差异均有极显著性(P0.01)；与 VD 模型组比较,VD 模 3 型组+当归补血汤组差异有极显著性(P0.01),正常组和假手术组比较无差异 （P0.01）。 【结论】1.当归补血汤能有效改善血管性痴呆大鼠的学习记忆能力； 2.当归补血汤改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力的治疗效应可能与增 强大鼠海马 CA1 区星形胶质细胞被活化，促进脑组织缺血灶及其周围组织的血管 新生,对受损神经元产生营养和修复作用有关。 【关键词】当归补血汤；血管性痴呆；学习记忆；GFAP；微血管密度； 4 Abstract 【Objective】: This study was based on the fine - blood - marrow one theory, that is, on the one hand directly upstream of blood sufficient to support the brain, on the other hand canspermatogenic blood, sperm can marrow. Experimental study Neoangiogenesis, astrocytes relationship between vascular dementia and ischemic tissue as a starting point, the use of animal models of vascular dementia, the behavior, morphology, proteomics, the study of blood the name of party Dangguibuxuetang model of learning and memory in rats, the brain morphological changes and expression of hippocampal CA1 GFAP number, which interpretive fine blood marrow one of t