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第三节 细菌形态与结构检查法 【教学内容】细菌的显微镜放大法和染色检查法法。 【教学要求】 掌握： 细菌的染色检查法。 　了解： 细菌的显微镜放大法。 【教学重难点】  重点：细菌的染色检查法。  　难点：细菌的染色检查法。 【教学时数】：2学时 【教学方法】：讲授法为主，演示法为辅。 显微镜放大法——细菌形体微小，肉眼不能直接看到，必须借助显微镜（普通光学显微镜、电子显微镜）放大后才能观察。 染色检查法——细菌体小,半透明，经染色后才能观察较清楚。 普通光学显微镜的分辨率为0.25um。一般细菌都大于0.25um，故可用普通光学显微镜观察。 电子显微镜的分辨率为1nm。不仅能看清细菌的外形，内部超微结构可一览无余。 （一）单染色法 1、原理 　　细菌的体积小，五色半透明，在普通光学显微镜下不易观察清楚，通常需染色来增加菌体与背景之间的色差，这比不染色标本清楚易辨。 由于细菌的等电点为pH2～5，在接近中性的环境中通常带负电荷，易与带正电荷的碱性染料相结合而染上颜色，故常用亚甲蓝、碱性复红、草酸铵结晶紫等染料染色。单染法只使用一种染料，所染的细菌均被染成一种颜色，一般能够显示细菌的形态、排列和大小，但不能显示细菌的内部构造。 ２、常用染料和器具 　　 　　大肠杆菌和金黄色葡萄球菌18～24h培养物，生理盐水，亚甲蓝染