坦布苏病毒mm1呢775株反向遗传操作系统的建立及拯救病毒的生物学特性研究-兽医专业毕业论文.docx

密级： 密级： 论文编号： 中国农业科学院 学位论文 坦布苏病毒MMl775株反向遗传操作系统的 建立及拯救病毒的生物学特性研究 Establishment of the Reverse Genetics System of Tembusu Virus MMl 775 Strain and Biological Characterization of the Rescued Virus 硕士研究生；闰大为 指导教师：李国新研究员 申请学位类别：兽医硕士 专业领域名称：兽医 培养单位：上海兽医研究所 研究生院 2015年6月 万方数据 Secrecy： Secrecy： NO． Chinese Academy of Agricultural Sciences Dissertation Establishment of the Reverse Genetics System of Tembusu Virus MMl775 Strain and Biological Characterization of the Rescued Virus M．S．Candidate：Dawei Yan Supervisor： Prof．Guoxin Li Degree： Master of Veterinary Science Specialty： Veterinary Medicine June 2015 万方数据 独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构的学位或证 书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了 明确的说明并表示了谢意。 研究生签名：J式水物 时问： h·Y年6月∑日 关于论文使用授权的声明 本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文的规定，即：中国农业科 学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业科学院可以用不同方式在不 同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 研究生签名： 术忉 时间： 7,ol歹年6月r日 导师签名： 扣哆 时间： +od-年；月t日 ／ 万方数据 中国农业科学院 中国农业科学院 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 坦布苏病毒MMl775株反向遗传操作系统的建立及拯救病毒的生 论文题目 物学特性研究 论文作者 闰大为 专业领域 兽医 研究方向 不嗲礅、。 指导教师 李国新 培养单位(研究所、中心) 辎镶 t勺 一烈《 》， 姓名 职称 单 位 专丝 } 蛩鲆黪：‘◇ ～ ＼二．==：／ 李泽君 研究员 上海兽医研究所 预防兽医学 评 阅 封文海 教授 中国农业大学 微生物学 | 人 辩 艇 答 主 秦爱建 教授 扬州大学 预防兽医学 席 锄少 孙建和 教授 上海交通大学 预防兽医学 答 御 于圣青 研究员 上海兽医研究所 预防兽医学 ”，初佤 胡青海 研究员 上海兽医研究所 预防兽医学 辩 p 勰％l 韩先干 副研究员 上海兽医研究所 预防兽医学 委 L I 口 贝 会议记录(秘书) 顾惠明 论文答辩时间地点 2015年5月26日，上海兽医研究所 万方数据 摘要自2010年鸭坦布苏病毒病在我国首次爆发以来，该病给我国鸭养殖业造成了巨大的经济损 摘要 自2010年鸭坦布苏病毒病在我国首次爆发以来，该病给我国鸭养殖业造成了巨大的经济损 失。该病主要表现为产蛋鸭产蛋率骤降，并伴有高热、食欲下降、运动障碍等临床症状，严重时 可导致鸭死亡。第一株坦布苏病毒分离株(MMl775株)，是从马来西亚地区的蚊子体内分离到的。 在随后几十年陆续从蚊子体内分离到很多株坦布苏病毒，但却很少有动物感染该病毒的报道。到 目前为止，早期坦布苏病毒蚊体分离株在不同动物体内的复制能力、对动物的致病性及在动物间 的传播能力等生物学特性尚不可知。了解坦布苏病毒早期分离株与我国现在流行的鸭坦布苏病毒 株的生物学特性的差异，对研究坦布苏病毒的致病机制具有重要意义。 为了比较MMl775和FX2010这两株病毒基因组序列的差异，本研究测定了MMl775完整的基 因组序列。通过5’和3’RACE技术扩增得到iVlMl775基因组5’和3’末端的序列。利用RT—PCR 扩增得到10段两两重叠的涵盖MMl775全基因组的目的片段，序列拼接后得到了MMl775全基因 组序列。与FX2010的全基因组序列相比，编码蛋白(C、prM、E、NSl、NS2A、NS2B、N