地尔硫对大鼠心肌梗死后金属蛋白酶表达的影响-内科学专业论文.docxVIP

中文摘要 中文摘要 前 言 急性心肌梗死(acute myocardial infarction，AMI)是危害人类 健康的严重疾患。有关心肌梗死及其并发症的治疗问题一直是医 疗界研究的热点。左室重构(1eft ventricular remodeling，LYRM)是 AMI后的一种普遍现象，与预后密切相关。t 地尔硫革是一种近年来开始应用的苯并硫氮革类的短效钙通 道阻滞剂(calcium antagonists，CCAs)，可通过阻断细胞壁中L型 钙通道而具有增加冠状动脉血流和降压等作用。对于此种药物是 否可改善心梗后的LVRM，较少有人研究。 本研究欲通过建立大鼠的心肌梗死模型，观察地尔硫革对金 属蛋白酶一2(matrix metalloproteinase一2，MMP一2)、金属蛋白酶 一9(matrix metalloproteinase一9，MMP一9)及胶原的影响，探讨地 尔硫革对AMI后心肌问质的影响，以推测其对LVRM的作用。 材料和方法 选健康雄性Wistar大自鼠45只，随机分成3组，每组15只。 第一组为实验组，开胸结扎左冠状动脉45分钟之后恢复血流，给 予地尔硫革3 mg．k’。．d“溶于1 ml生理盐水内，分3次缓慢 腹腔注射；第二组为对照组，开胸结扎左冠状动脉45分钟，之后恢 复血流，给予等量的生理盐水腹腔注射；第三组为假手术组，开胸 后只挂线而不结扎冠状动脉，亦给予同量的生理盐水腹腔注射。 以上三组大鼠于手术后第15天处死。取下心脏，固定，常规石蜡 包埋，切片，HE染色观察左室结构变化，免疫组化SP法检测心肌 包埋，切片，HE染色观察左室结构变化，免疫组化SP法检测心肌 组织切片内MMP一2、MMP一9表达，用VG特殊染色检测胶原容 积百分比。计算机图像分析系统半定量分析。应用SPSS 11．0软 件包ANOVA等方法行统计学处理。 实验结果 1．45只大白鼠手术后死亡18只(包括手术后第1天死亡的 大鼠，实验组7只，对照组8只，假手术组3只)。手术过程中总死 亡率为40％。 2．一iX,肌组织HE染色形态学观察：本实验动物经左冠状动脉 结扎45分钟后再灌注形成非透壁性心肌梗死，在心内膜下及心外 膜下均有～定数量的心肌保存完好。实验组和对照组可见心肌梗 死发生。假手术组无心肌梗死发生。实验组及对照组与假手术组 相比，左室腔面积扩大，室间隔厚度和游离壁厚度均增加，梗死区 厚度变薄，差异显著(P0．05，P0．01)；实验组经地尔硫革治 疗后上述改变程度减轻或接近正常。 3．VG染色显示：实验组和对照组梗死区胶原增生明显，但实 验组明显少于对照组(F0．001)。假手术组仅见极少量胶原纤 维。 4．免疫组化染色结果：实验组及对照组心肌细胞内均见很强 的MMP一2、MMP一9阳性表达，但实验组阳性表达明显减弱，而 假手术组只有极散在的弱阳性反应细胞。实验组大鼠心肌细胞内 MMP一2表达与对照组相比(P0．001)，MMP一9表达与对照组 相比(Po．01)，二者与假手术组相比分别为(P0．01，P0． 001)，均存在显著差异；对照组大鼠心肌细胞内MMP一2和MMP 一9表达与假手术组相比亦存在显著差异(P0．001)。 ·2· 讨 讨 论 心肌梗死后LVRM是指AMI后整个左心室(包括梗死区和非 梗死区)形态和大小的改变。新近的概念还包括细胞形态、结构 和间质结构的改变。重构过程包括梗死膨展(infarct expansion， IE)和心室整体扩张(global ventricular dilatation，GVD)，由此导致 心脏几何形态改变。以往人们对于心室重构时心肌细胞数量和形 态的变化研究较多，近年来人们开始重视胶原在心室重构中的作 用。AMI后心肌细胞外基质(extracellular matrix，ECM)的变化主 要是胶原沉积和纤维化，胶原损伤甚至出现在心肌细胞损伤之前。 梗死后心律失常、梗死膨展、心脏破裂等均可能与胶原损伤有关。 若能减少胶原降解和刺激愈合，就有可能限制心室扩张和重构。 MMPs是锌金属蛋白酶的一族，是心脏基质重构的主要推动 力。与胶原代谢有关的酶主要有三种：MMP一1、MMP一2及MMP 一9。心肌梗死后胶原酶(MMP—1)激活，降解心肌问质胶原蛋白 肽链的三螺旋结构。在距肽链C末端1／4处，将其分解为两个片 断，随后明胶酶(MMP一2、MMP一9)等参与完成其后的非特异性 分簿代谢。因此可通过测定MMP一2、MMP一9的表达间接反映 MMP一1的表达。MMPs预先以前酶原形式存在，在许多心脏病 理条件下(如心梗、心衰)表达增强、激活。MMPs活性增强可导致 纤维胶原降解、ECM重构和进行性心室扩张甚至破裂。因此如能 寻找一种药物来抑制MMPs的合成和激活，