2018年天津市德国小蠊抗药性监测方案设计.docx

天津市2018年德国小蠊抗药性监测方案 病媒生物防治中化学防治是主要手段之一，近年来由于大量卫生杀虫剂的使用，使病媒生物抗药性不断增加，如何合理使用卫生杀虫剂，科学指导用药，抗药性监测成为关键；同时为加强各区疾控中心病媒生物防治能力，达到绩效考核要求，天津市于2018年继续开展主要病媒生物（德国小蠊）抗药性监测。为规范高效开展此项工作，特制订本方案，内容如下： 一、目的及意义 1、掌握我市德国小蠊对常用杀虫剂的抗药性状况； 2、为科学合理使用卫生杀虫剂提供依据； 3、完成绩效考核工作指标； 4、提高病媒生物防治水平，加强区疾病预防控制中心专业队伍能力建设。 二、监测的组织分工职责 1、天津市疾病预防控制中心职责：负责根据国家要求拟定天津市病媒生物抗药性监测方案，以及抗药性监测工作的组织、协调和督导；承担抗药性监测的技术指导和培训，对工作做出总结与报告。 2、区疾病预防控制中心职责：所在的辖区疾病预防控制中心，负责协调试虫采集点选定及试虫采集，逐步独立开展抗药性监测工作。 三、监测实施 1、监测时间 依据试虫生态习性，结合全国主要病媒生物抗药性监测要求，监测工作全年开展。 2、标靶昆虫 监测点采集试虫为监测对象，本中心饲养室饲养试虫作为敏感对照。 3、监测点选择 每个区为一个监测点，选取一处试虫采集地点，主要选择居民区、餐饮、农贸市场、医院及食品加工销售等蟑螂密度较高地点且人活动频繁的区域。 4、试虫采集 使用吸尘器或诱捕器（内部放置诱饵）、捕蟑器或粘蟑板等在所选生境采集试虫（为F0代），数量不少于300只，常规饲养。室内饲养1代（为F1代），选取F1代羽化后7日龄-15日龄，体态正常，没有残疾，活动敏捷的雄成虫作为实验试虫。 5、监测药剂选择 根据工作要求，每年选择3大类6种药物进行试验，药物的选择原则不变或根据实际用药进行选择，药物选择标准品进行试验。2018年选用以下6种药物： ①溴氰菊酯（deltamethrin） ②高效氯氰菊酯（β-Cypermethrin） 拟除虫菊酯类 ③氯菊酯（permethrin） 拟除虫菊酯类拟除虫菊酯类 ④乙酰甲胺磷（acephate） 有机磷类 ⑤残杀威（propoxur） 氨基甲酸酯类 ⑥高效氯氟氰菊酯（λ-Cyhalothrin） 拟除虫菊酯类 监测方法 采用药膜法，参见GB/T26352-2010。 药膜制备：母液，稀释至一个系列浓度。 浓度范围的确定：通过预实验确定药剂的浓度系列范围，该范围的最低浓度为该浓度时试虫死亡率在0-20%之间。最高浓度为该浓度时试虫死亡率在90-100%之间。取不同浓度药剂溶液2.5mL加入500mL锥形瓶中，不断转动锥形瓶，使药液均与分布于瓶内壁，置于通风橱中过夜，使有机溶剂全部挥发。 接虫 每瓶10只，用纱网或纱布封口。重复3次，以相应溶剂为对照组。 24h 后记录死亡情况。 死亡判断：用锐器触动，不能正常爬行或者完全不动视为死亡。 抗性倍数=待测种群LC50值/敏感种群LC50值，且标明敏感种群LC50值的数据来源。 敏感品系和测定样本95%置信界不重叠，且抗性倍数大于等于5倍为抗性种群。 试验条件温度：温度26±1℃，相对湿度75%±5%。 7、数据结果统计与评价 死亡率=（死亡虫数/试虫总数）?100% 对照死亡率小于5%无需校正；对照死亡率在5%～20%之间，用Abbott公式校正。对照死亡率大于20%为无效测定，需重新进行测定。 校正死亡率=（处理组死亡率-对照组死亡率）/(1-对照组死亡率)?100% 抗药性水平判定标准：（校正）死亡率小于80%为抗性种群。 用POLO软件或DPS软件及相关统计程序进行数据统计，计算KT50值、KT95值。对照死亡率超过20％时需要重新进行试验。用同样方法测定敏感品系KT50值、KT95值。计算抗性倍数。抗性倍数=待测种群 KT50值/敏感种群 KT50值。 四、工作流程 1、采集点选择：由区县疾病预防控制中心工作人员推荐； 2、试虫采集及运送：区疾病预防控制中心工作人员采集运送试虫，交付天津市疾病预防控制中心病媒科； 3、天津市疾病预防控制中心病媒科转交试虫给病原生物检测所并办理交接手续； 4、试虫的饲养与繁殖到实验期间由病原生物检测所负责； 5、病原生物检测所实验室进行德国小蠊抗药性生物测定； 6、病原生物监测所实验室汇总分析结果出具抗药性评价报告；独立开展抗药性监测工作的各区县上交总结报告及原始记录电子版到市疾病预防控制中心病媒生物科。 7、病媒生物科审核报告，根据报告撰写总结； 五、质量控制 （1）试验质量控制: 若空白对照组死亡率＞20%，则试验重做；若对照组死亡率≤20%，则用A