胶滴肿瘤药敏检测技术cd-dst的建立及到临床应用研究.doc

中国医学科学院中国协和医科大学硕士学位论文 PAGE 36 - 论文题目 胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)的建立及临床应用研究 研 究 生： 梁智 导 师： 张伟 研究员 学科专业： 细胞生物学 研究方向： 药敏检测技术 所在所院： 肿瘤医院 肿瘤研究所 入学时间： 2003年9月 二零零六年五月 目录 缩略语表1 中文摘要2 英文摘要4 前言6 材料与方法9 实验材料 实验细胞系 主要实验仪器 主要试剂和耗材 病人资料及肿瘤标本 实验方法 主要试剂的配制 细胞的复苏与冻存 不同培养条件对肿瘤细胞生长支持度的测定 所用培养基对肿瘤细胞系生长支持度的测定 所用培养基对原代肿瘤细胞系生长支持度的观察 I型胶原蛋白包被对肿瘤细胞系和原代肿瘤细胞生长支持度的观察 胶滴肿瘤药敏检测（CD-DST）的建立 利用肿瘤细胞系建立胶滴培养技术 胶滴培养药敏技术的药物测试浓度 原代肿瘤细胞的体外胶滴肿瘤药敏检测 ATP-TCA法药敏检测 结果23 胶原包被对肿瘤细胞生长状态的影响 所用培养基对肿瘤细胞生长支持度的动态观察 肿瘤细胞在胶滴培养中生长状态的观察 药物体外的杀伤作用 图像的分析 CD-DST法与ATP-TCA二种技术的相关性比较 CD-DST法的标本可评价率 肿瘤标本对化疗药物的体外敏感性 讨论35 结论45 参考文献45 文献综述45 致谢23缩略语表 缩略语 英文名 中文名 CD-DST Collagen gel droplet culture drug-sensitivity test 胶滴肿瘤体外药敏检测技术 ATP-TCA ATP bioluminescence ex vivo tumor chemosensitivity assay ATP生物荧光肿瘤体外药物 敏感性检测 MTT Methylthiazoletetrazolium 四唑蓝 HTCA Human tumor clonogenic assay 软琼脂克隆形成实验 DiSC Differential staining cytotoxicity assay 差异染色细胞毒检测 IC50 Inhibition concentration 50% 杀伤50%肿瘤细胞所需药物浓度 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 OD Optical density 光密度值 胶滴肿瘤药敏检测技术(CD-DST)的建立 及临床应用研究 中文摘要 目的：建立胶滴肿瘤体外药敏检测技术，探讨其在肿瘤个体化治疗中应用的可行性。 方法：用人类肿瘤细胞系建立胶滴肿瘤体外药敏检测技术；并用该技术对50例不同肿瘤类型的原代肿瘤标本进行药敏检测实验研究，其中包括妇科恶性肿瘤18例，胃肠道恶性肿瘤15例，白血病/淋巴瘤8例，肺癌 5例，肝癌4例。每种肿瘤标本分别进行了4-5种包括阿霉素 (ADM)、 5-氟脲嘧啶 （5-FU）、顺铂 (DDP)、丝裂霉素 (MMC)、紫杉醇（PTX）、草酸铂（L-OHP）和健择（GEM）等抗肿瘤药物的敏感性测定。 结果：在体外成功建立了胶滴肿瘤药敏检测技术，并确定了胶滴肿瘤体外药敏检测技术的最佳条件；该技术与ATP生物荧光肿瘤体外药敏检测技术（ATP-TCA）相比具有较好的相关性；该技术检测所需标本量小（3×103个细胞/滴）可扩大其应用范围；实验证实该技术可反映病人对不同抗肿瘤药物敏感性的差异；标本整体评价率为82.0%（41/50）；检测结果与临床经验有效率间有较好的符合性。 结论：CD-DST法体外肿瘤药敏检测技术是一种较好的药敏检测方法，标本可评价率为82.0%（41/50），所需标本量小的特点使其扩大了在临床上的应用范围。该技术可反映病人对不同抗肿瘤药物敏感性的差异，检测结果与临床经验有效率有较好的符合性。因此该药敏检测方法对抗肿瘤药物筛选和对个体化治疗具有实际应用价值。该技术的建立填补了国内该领域的空白。 关键词：肿瘤 药敏检测 胶滴肿瘤药敏检测技术 The Establishment of Collagen gel droplet culture drug-sensitivity test (CD-DST) Techniques and Its Clinical Application Abstract OBJECTIVE: To establish Collagen gel droplet culture drug-sensitivity test (CD-DST) technique and explore its clinical