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壳寡糖工衍生物
河南农业大学理学院本科毕业论文
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1 绪论
1.1 壳寡糖及其衍生物
甲壳素和壳聚糖(CTS)具有许多天然的优良性质,如吸湿透气性、反应活性、生物相容性、生物可降解性、无抗原性、无致炎性、无有害降解产物、吸附性、粘合性、抗菌性和安全性等。从而被广泛应用于纺织工业、生物医学和日用环保等方面。CTS还被誉为人体的“第6生命要素”。有人评论认为甲壳素将成为21世纪的支柱产业之一。曾有科学家预言“21世纪将是甲壳素的世纪”。近几十年来.甲壳素和CTS已成为日、美等国家的热门研究课题。我国从20世纪中期也开始开展有关的研究和产品开发。CTS的结构式如下图。
由于甲壳素和CTS的水不溶性.限制了它们的应用范围,而通过降解甲壳素或壳聚糖得到的壳寡糖(其聚合度在2O以)是一类无毒且具有良好的生物降解性和生物相容性的高分子物质,其优越的生物活性功能、良好的成膜特性和较强的抗菌防腐保鲜能力已引起国内外研究人员的广泛关注和重视。经过生物降解的低分子量壳寡糖具有广谱的杀菌作用。壳寡糖是氨基葡萄糖通过β-1,4-糖苷键连接而成的相对分子质量低于10 000的低聚糖。低黏度和良好的水溶性使壳寡糖比壳聚糖展现出更独特的生理活性和功能性质,如抗菌、抗肿瘤、提高植物防御能力等。因此,这些寡糖的研究引起了国内外重视,在农业、医疗、食品、化妆品等领域有着广泛的应用前景。
1.1.1 植物诱导抗性领域
壳寡糖作为一种激发子,可有效地诱导植物抗病性,增强植物对病虫害的防御能力。其作为植物免疫激活因子的基础研究始于20世纪60年代。Ayers等[1]于1976年发现细胞壁的寡糖碎片能诱导植物植保素(phytoalexin)合成仁;1985年Albersheim[2]首次提出了寡糖素(oligosaccharins)这个新概念和新领域,每种活性寡聚糖可发出调节特定功能的信息,激活防御反应和调控植物生长,产生具有抗病害的活性物质,抑制病害的形成。活性寡聚糖是一类具有一定结构和生物活性的聚合体,国际上研究较多的是植物及微生物细胞壁多糖降解的寡糖片断。越来越多的实验结果表明,植物细胞壁不仅能起到防御的结构屏障作用,而且当植物受到病菌感染时能产生积极的防御反应。
(1)对烟草的诱导抗性
烟草花叶病毒病(TMV)在生产上的危害很大,至今仍缺乏有效的治疗药剂。目前,选择合适的诱抗剂不失为一种有效的防治方法,其广阔的应用前景已引起人们的高度重视。郭红莲等[3]以壳寡糖诱导烟草枯斑三生叶(Nicotiana tabacum var.samsun NN)寄主后,调查了其对病斑的抑制率,同时研究了壳寡糖单独处理和以病毒粒子侵染诱导的病程相关蛋白的差异,结果表明,壳寡糖处理对TMV侵染有保护作用,施用后7d,以浓度为50μg/mL和75μg/mL时其对枯斑的抑制效果为好。通过体外测试发现,壳寡糖对TMV粒子有钝化作用。单独施用壳寡糖可以诱导烟草产生6条耐碱性的PR蛋白,其中1条区别于TMV侵染诱导的PR。Lu等[4]将壳寡糖喷洒于感染烟草花叶病毒(TMV)的烟草叶片上,在接种后24小时发现50微克/毫升壳寡糖对烟草花叶病毒的抑制率最高,研究结果表明,壳寡糖诱导烟草防御是与N-介导的抗性有关。
(2)对水稻的诱导抗性
稻瘟病和纹枯病是水稻的重要病害,在世界范围内每年造成上亿千克产量损失,高发病时甚至可以造成减产50%。Obara等[5]用固相微萃取技术和GC-MS法分析不同诱导剂释放的挥发物作为诱导剂处理稻瘟病菌Pyricularia oryzae,将病菌嫁接到水稻叶片上(含有壳寡糖),发现不同的诱导剂产生的挥发物在定性和定量上有一些差别。Inui等[6]将一系列浓度的壳寡糖放到水稻培养液中,也发现其能够诱导苯丙氨酸解氨酶(PAL)。胡健等[7]结果表明:相对分子质量不同的壳寡糖对供试水稻品种叶片几丁质酶的诱导作用不同,相对分子质量为1 500的壳寡糖诱导效果最佳,而相对分子质量为500的壳寡糖诱导效果最差。不同水稻品种对纹枯病的抗性不同,其几丁质酶的诱导能力也不同,无论是苗期还是抽穗期,抗病能力强的水稻品种,几丁质酶的诱导水平也高。宁伟等[8]对30株水稻幼苗发病情况的统计结果显示,经5μg·mL-1壳寡糖处理的水稻植株抗稻瘟病能力明显增强,病斑级数为2~3级,植株抗病级数为1~2级;而未经壳寡糖处理的植株极大部分病斑为感病病斑,发病级数在4~5级。
(3)对胡萝卜的诱导抗性
Chris等[9]利用链霉菌N-174壳聚糖酶制备了平均聚合度为7的(质量浓度为0.2 %)的壳寡糖,并用其处理收获后的胡萝卜,针对其核盘霉菌,测量了它的抑制系数。发现核盘霉菌在马铃薯琼脂上呈放射状生长,这使得胡萝卜在放置3 d以上时就开始腐烂。但当在零度或使用
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