滤过灭菌在制药过程中的应用----滤朵过灭菌.pptVIP

* 上海德圆科技发展有限公司 A:链球菌 * 上海德圆科技发展有限公司 B：大肠杆菌 * 上海德圆科技发展有限公司 C：螺旋菌 C：弧状菌 * 上海德圆科技发展有限公司 放大15000倍的膜孔 图13 细菌及膜孔径形貌 * 上海德圆科技发展有限公司 膜过滤网格示意图 * 上海德圆科技发展有限公司 根据上述细菌的尺寸，用微滤级的膜即可截留去除。微滤膜的孔径大小基本上在微米级以上，通常比较典型的例子，即大肠杆菌直径是0.5μm,可以用0.2μm孔径的微滤膜去除。膜过滤孔径的选择是小于被过滤物质的1/2为好。膜孔越小，通量也越小，为了保证产量，可根据不同的菌种选择不同规格的膜种，这样既保证了质量，也提高了产量。也不要一味地追求产量而选用过大的膜孔径，这样会导致膜过滤功能的过早衰退。因为大孔径的膜容易进入大分子物质，容易造成对膜孔的污堵，使膜寿命大幅度下降。 * 上海德圆科技发展有限公司 2.2.2 膜孔径截留病毒 细菌代谢过程中产生的毒素则更小，用微滤膜过滤就不能去除。如藻类毒素是致肝癌原凶之一，在制药水中需要用超滤膜进行去除，超滤膜的孔径属于纳米级别，对于病毒或细菌产生的毒素有良好的去除作用。德圆公司生产的中空纤维超滤膜对微囊藻类毒素进行清除，经上海预防研究所检测后证明有非常好的去除功效。 * 上海德圆科技发展有限公司 微囊藻类毒素 超滤前 pg/ml 超滤后 pg/ml 备注 蓝藻类 1333.63 1.09 20pg/ml作为探测不到 混合藻类 5219.43 12.59 藻类毒素过滤效果表 * 上海德圆科技发展有限公司 藻类菌 肝炎病毒 爱兹病毒 * 上海德圆科技发展有限公司 冠状病毒 * 上海德圆科技发展有限公司 病毒的颗粒很小，其尺寸均属于纳米级别。过滤病毒则是超滤膜最为特长的功能。它可以将病毒完全清除掉，只要选择的截留规格完全正确。下图A是一种DNA的病毒颗粒和RNA的病毒颗粒，其图片分别标定了尺寸为300nm和50nm。而B是超滤膜的孔径，只有几个纳米。从下图两套图片可以看到扫描电镜图片中的超滤膜孔远小于病毒颗粒。这样对于去除病毒，又保留了有药效的成分有着很重要的意义。因此制剂过程中对于膜的这种过滤功能应该加以很好的利用。 * 上海德圆科技发展有限公司 膜孔径 病毒微粒 * 上海德圆科技发展有限公司 三 生物制剂中内毒素的清除 细菌内毒素又称热原，是细菌新陈代谢和细菌死后分解的产物。热原的致热效能很强，人类对热原的反应比动物敏感，所以在静脉注射药液时，如将热原带进血液，约15分钟到8小时之内就发生冷战、哆嗦、体温明显升高等症状，甚至休克以至死亡。 德圆公司研制出数种超滤膜，均可一次去除水中、针剂中的细菌和热原。鲎法、兔法检测，未经超滤的样品热原反应均为阳性，凡经超滤的样品均为阴性，效果理想。 * 上海德圆科技发展有限公司 3.1 内毒素的来源与结构 细菌内毒素是革兰氏阴性菌细胞壁上的一种脂多糖（Lipoply Saccharide）和微量蛋白（Protein）的复合物，它不是细菌或细菌的代谢产物，而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有内毒素生物活性的物质。其化学成分广泛分布于革兰氏阴性菌（如大肠杆菌、布氏杆菌、伤寒杆菌、变形杆菌、沙门氏菌等）及其它微生物（如衣原体、立克次氏体、螺旋体等）的细胞壁层的脂多糖，其化学成份主要是由O-特异性链、核心多糖、类脂A三部分组成。 * 上海德圆科技发展有限公司 细菌结构剖析 * 上海德圆科技发展有限公司 内毒素结构图 * 上海德圆科技发展有限公司 脂多糖主要功能有四方面： 1 革兰氏阴性细菌致病物质——内毒素的物质基础； 与磷壁酸相似，也有吸附Mg2+、Ca2+等阳离子以提高这些离子在细胞表面的浓度的作用； 2 由于LPS结构的变化，决定了革兰氏阴性细菌细胞表面抗原决定簇的多样性，例如，据统计（1983），国际上已报道过的根据LPS的结构特性而鉴定过Salmonella（沙门氏菌属）的表面抗原类型多达2107个； 3 许多噬菌体在细胞表面的吸附受体。 4 脂多糖要维持其结构的稳定性需要足量Ca2+的存在。如果用螯合剂去除Ca2+，内毒素就解体。这时，革兰氏阴性细菌的内壁层肽聚糖就暴露出来，因而就可被溶菌酶所水解。 * 上海德圆科技发展有限公司 3.2 内毒素膜去除法 内毒素广泛地存在于水、医药制剂、体液、食品之中，其危害性之大