猪源绿色气球菌的分离鉴定及16SrRNA基因序列测定.pdf

中国农学通报 2014,30(29): 15-21 Chinese Agricultural Science Bulletin 猪源绿色气球菌的分离鉴定及16SrRNA基因序列 测定与遗传进化分析 张乐宜，李 艳，蔡汝健，刘燕玲，蒋智勇，宋长绪 （广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省兽医公共卫生公共实验室，广州510640） 摘 要：为研究引起广东部分地区猪场仔猪发生急性死亡的致病菌及其系统发育地位，本研究从广东英 德、惠州龙门、翁源、汕头等地区猪场急性死亡病仔猪中分离到6 株呈α溶血的细菌。通过细菌形态学观 察、生化特性鉴定、药敏试验、致病性试验以及16SrRNA基因的序列分析，确定为猪源绿色气球菌，分别 命名为HD、WY、ZQ 、LM、YD和ST。动物感染试验表明：6 株分离菌株均具有不同程度的致病性；药敏结 果显示：6 株分离株均对头孢曲松、头孢唑啉、恩诺沙星、阿莫西林高度敏感，对新生霉素、利福平、阿米 卡星、庆大霉素、多粘菌素B 中度敏感，对其他抗生素均耐药；同源性及遗传进化分析结果显示：6 株分 离株与12株国内外参考菌株核苷酸同源性在93% 以上，其中与澳大利亚分离自犬的15MS 株同源性最 高，为98.1% ，与广西分离自猪的GXBL-1株同源性最低，为83.6% ；6 株分离株与广东分离株和澳大利亚 分离株亲缘关系最近，暗示进化不存在明显的地域相关性。本研究确定了广东部分地区引起规模化猪 场仔猪发生急性死亡的病原菌，为该菌引起的疾病的防治提供了依据。 关键词：绿色气球菌；分离鉴定；16SrRNA；遗传进化分析 中图分类号：S852.61 文献标志码：A 论文编号：2014-0271 IsolationandIdentificationofAerococcusviridansfromSwineand PhylogeneticAnalysisof16SrRNAGeneSequence ZhangLeyi,LiYan,CaiRujian,LiuYanling,JiangZhiyong,SongChangxu (InstituteofAnimalHealth,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences/ GuangdongOpenLaboratoryofVeterinaryPublicHealth,Guangzhou510640) Abstract:InordertoinvestigatethepathogenofacutedeathoccurredofpigletsfrompigfarmsinGuangdong provinceandthephylogeneticposition,sixstrainsofalphahemolyticbacteriawereisolatedfromsickpiglets withacutedeathinpig-rearingfarminYingde,Longmen,Wongyuan,ShantouregionsofGuangdongprovince. Morphologicalobservation,biochemicalidentification,drugsensitivetest,pathogenicitytestandsequence analysisof 16SrRNA genesconfirmedthesixstainsofalphahemolyticbacteriaasporcinegreengasaureus, designatedHD, WY,ZQ,LM, YDandST,independently.Pathogenicitytestshowedthat,thesixisolateshad differentdegreeofpathogenicity.Theresultsofdrugsensitivetestindicatedthat,thesixisolateswerehighly sen