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现代生物村技术专题讲座(陈景红)
高三生物专题讲座现代生物技术 上海市实验学校 陈景红 考纲要求 考点解读 知识整合 情景题 2009年2月2日,山东省干细胞工程技术研究中心宣布成功克隆出5枚符合国际公认技术鉴定指标的人类囊胚。该课题首席专家称他们掌握此项技术不是为了制造克隆人,而是进行人类治疗性克隆研究。 知识整合 生物技术也称生物工程,它是人类应用生命科学理论和工程科学技术手段,按照预先设计的蓝图,大规模的生产人类所需要的物质和产品的技术。 生物工程主要领域之间关系 生物工程的特点 高效性和经济性 清洁和低耗 强调技术设计 可遗传和可扩散 对人类伦理道德观念有影响 一、核心技术——基因工程 概念:是一种通过体外DNA重组(人工的方法)创造生物新类型,并获得多肽或蛋白质等基因产品(表达)的技术。 分类:微生物基因工程、植物基因工程、动物基因工程。 过程:获取目的基因、目的基因与运载体重组、重组DNA分子导入受体细胞、筛选含目的基因的受体细胞。 获取目的基因的方法(从细胞中分离、用化学方法人工合成) 鸟枪法 基因文库的构建 PCR法(聚合酶链反应) 反转录法 化学合成法 酶:限制酶、连接酶。 运载体的选择 能在宿主细胞内复制并稳定的保存 具有多个限制酶切点, 具有某些标记基因(荧光标记、抗生素标记等) 受体细胞的筛选:筛选目的基因表达的受体细胞 微生物基因工程(发酵工程) 由于微生物繁殖迅速、结构简单、遗传操作较为容易,所以微生物基因工程具有技术比较成熟、研制周期比较短、通过发酵可以大量生产等优点。 植物基因工程 培育抗逆植物、园艺植物、植物疫苗等 动物基因工程 概念:动物基因工程通常以动物的受精卵作为受体细胞,用显微注射的方法将目的基因导入动物的受精卵中,再使受精卵发育成个体而获得转基因动物。 应用: 1.在基因表达调控研究方面的应用 2.用于基因产品的制备(培育乳腺生物发生器) 3.动物品种的培育与改良? (获得优良性状的动物新品种?) 显微注射法进行动物转基因的基本过程 胚胎干细胞法 胚胎干细胞介导法 胚胎干细胞(embryonic?stem?cell,ES)是指从哺乳动物胚胎囊胚期内的细胞团中分离出来的尚未分化的胚胎细胞,这种细胞具有发育的多能性,能够分化出各种组织。这个途径是将外源基因直接导人ES细胞,经体外培养筛选后再注入到受体囊胚腔中,与其中的囊胚细胞聚集在一起,成为受体胚胎的一部分,参与其分化。由这种胚胎发育而成嵌合体的转基因动物,即其中有一部分组织来源于整合有外源基因的供体ES细胞。在嵌合过程中,被转化的ES细胞分化而成的生殖细胞可通过杂交将引入的外源基因传递下去。 反转录病毒法 反转录病毒转移基因 反转录病毒是一类含有RNA的动物病毒,它的基因组进入寄主细胞内,在反转录酶催化下合成DNA。反转录病毒的这种特性说明它有可能是一种天然的转导因子,可经人工操作改建为动物基因的转移载体。另外,反转录病毒感染效率高,但却不会招致寄主细胞的死亡,被它感染或转化的动物细胞常可持续许多世代。反转录病毒可用作载体的另一个优点是其寄主范围广泛,包括无脊椎动物和脊椎动物,其中有的还能够在人体细胞中生长。 基因治疗 概念:是一种从根本上治疗遗传病的方法,即用正常的基因置换遗传缺陷的基因,或增补缺失的基因。 体外治疗 体内治疗 (基因诊断——DNA分子杂交法) 转基因生物产品的安全性 对生态环境——基因漂移,影响生物的多样性 对人类健康——转基因食品是否含致敏物质。 二、细胞工程 概念:就是在细胞水平上,以细胞生物学理论和技术为基础,结合现代工程技术手段以及其他学科的科学原理和技术,研究、开发和利用细胞的现代技术。 (一)植物组织和细胞培养技术 将无菌的外植体接种在含有营养物质和植物激素等的培养基中进行无菌培养,使其形成芽、根,并发育成完整植株的技术。分为以下四个阶段: 预备阶段(外植体、MS培养基) 诱导去分化阶段 再分化阶段(细胞分裂素与生长素浓度比不同诱导生成根、愈伤组织、芽) 移栽阶段 常用技术手段:植物组织培养,植物体细胞杂交。 理论基础:植物细胞的全能性 ? 植物组织培养技术的应用范围:快速繁殖、培育无病毒植物,通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。 (二)动物组织和细胞培养技术 概念:动物组织和细胞培养是从动物体内分离出组织和细胞,在无菌和适宜的温度和营养条件下,使组织或细胞生长和繁殖的一门技术。 应用:获得一定数量的细胞用于临床治疗;生产生物制品,如抗体、激素、酶、生长因子等。 条件:适宜的温度、pH值、溶解氧、渗透压。 培养基成分:葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。 (三)干细胞技术 干细胞
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