解氏金丹水丸对高脂状态下大鼠成义骨细胞bmp2 er表达的影响.docxVIP

独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工 作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地 方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含 为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。 与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名：塑盔堡 签字日期：醴年』月塑日 学位论文版权使用授权书本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者及指导教师完全了解大连医科大学有关保留、使 用学位论文的规定，同意大连医科大学保留并向国家有关部门或机构 送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权 大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库 进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论 文。 论文作者签名： 指导教师签名： 签字日期： 乙坐上月丝日 解氏金丹水丸对高脂状态下大鼠成骨细胞 解氏金丹水丸对高脂状态下大鼠成骨细胞 BMP2、ER表达的影响 硕士研究生： 郑希福 指导教师： 张卫国 教授 专业名称： 外科学 摘 要 目的：研究高脂状态下大鼠成骨细胞BMP2(骨形态发生蛋白2)、ER(雌 激素受体)的表达变化情况：研究解氏金丹水丸中药方剂含药血清干预高脂状 态时BMP2、ER的表达变化情况。 方法：取新生24小时内的SD大鼠颅骨，去除表面血管、骨膜等软组织。 利用组织块法原代培养成骨细胞，并进行成骨细胞纯化和鉴定。取第3代成 骨细胞，分别在无胆固醇血清和高胆固醇血清培养基中培养，并根据MTT 法(测OD值)检测成骨细胞增殖率和细胞形态学观察，选择某一高胆固醇血 清浓度，检测BMP2(骨形态发生蛋白2)、ER(雌激素受体)的mRNA水平变化； 在以上确定的高胆固醇血清浓度培养状态下，根据是否预先加入解氏金丹水 丸中药方剂含药血清，分为实验组与对照组，依照MTT检测细胞增殖的结果 和细胞形态学观察得出实验组的最佳血清药物浓度，再次检测BMP2和ER 的mRNA表达变化。对上述结果进行分子生物学、免疫学和统计学分析。 结果：细胞形态学观察和MTT法检测结果显示，与无胆固醇血清培养成 骨细胞相比，高胆固醇血清培养的细胞增殖受到抑制，生长缓慢。采用分子 生物学技术检测BMP2、ER的mRNA水平变化，高胆固醇血清中BMP2、ER 的mRNA表达明显低于无胆固醇血清(PO．01)：在高胆固醇组中预先加入解 氏金丹水丸中药方剂含药血清，再次进行上述分子生物学检测，与空白对照 血清干预高胆固醇血清培养细胞相比，加入中药血清组BMP2、ER的mRNA 表达水平明显升高(P0．01)，细胞形态学观察可见细胞增殖与生长情况得到 改善。 结论：高胆固醇血清降低成骨细胞ER、BMP表达，降低成骨活性；解 氏金丹水丸中药方剂可以增强高胆固醇血清环境下成骨细胞BMP2、ER的 mRNA表达，明显改善成骨细胞生长状态，提高成骨活性。 关键词： 高脂血症 骨质疏松症 中药血清 BMP2 ER The The Influence of XieShiJinDanShui腑n Chinese herb on the BMP2 and ER Expression of Osteoblast from Rat Master degree candidate：Zheng Xi fu Supervisor：Professor Zhang Weiguo Major：Surgery A bstract Obj ectives：To study the exchanges of BMP2 and ER expression of osteoblast from rat treated with and without XieShiJinDanShuiWan Chinese herb under the condition of hyperlipidemia． Methods：New born SD rats(24 hours)were admitted，the skull and scalp were removed，osteoblast was purified and analyzed．The 3rd generation osteoblast was cultured in the serum of non-Cholesterol and hyperCholester01．The proliferation rate and morphological characters were c