发酵工上程课件第六章.pptVIP

第六章 发酵机制及发酵动力学 第一节 发酵工程微生物的基本代谢及产物代谢 第二节 微生物代谢调节机制 第三节 糖代谢产物的发酵机制 第四节 氨基酸和核苷酸发酵机制 第五节 抗生素发酵机制 第六节 微生物发酵动力学 本章要求 掌握初级与次级代谢的产物 掌握微生物代谢调节的方式 掌握酶活性被抑制的方式 了解发酵产物的发酵机制及发酵动力学 第一节 发酵工程微生物的基本代谢及产物代谢 初级代谢及产物 多糖、蛋白质、核酸和氨基酸等。 次级代谢及产物 抗生素、毒素、激素和色素等。 第二节 代谢调节方式与机制 一、调节方式 代谢途径区域化 代谢流向的调控 代谢速度的调控 细胞透性的调节 能荷调节 对利用ATP的途径（合成代谢）的酶活性或形成ATP的途径（分解代谢）的酶活性的调节。 第三节 糖代谢产物的发酵机制 一、 厌氧发酵代谢产物发酵机制 葡萄糖在微生物细胞中进行厌氧分解时，通过EMP（糖酵解途径）、HMP（磷酸戊糖途径）、ED （ 2-酮-3-脱氧-6-磷酸葡萄糖酸裂解途径）及PK（磷酸酮解酶途径）和HK （磷酸己糖解酮酶途径）形成多种中间代谢产物。 二、好氧发酵代谢产物的发酵机制 （一）柠檬酸 1874年首次从柠檬汁中提出柠檬酸并结晶成固体；1913年首次实现利用黑曲霉发酵生成柠檬酸。 ③丙酮酸氧化脱羧生成乙酰CoA和CO2固定两个反应的平衡，以及柠檬酸合成酶不被调节，增强了合成柠檬酸的能力。 ④由于顺乌头酸水合酶在催化时建立了以下平衡： 柠檬酸：顺乌头酸：异柠檬酸=90：3：7 同时控制Fe2+含量时，顺乌头酸酶活力降低，使柠檬酸积累。 ⑤随着柠檬酸积累，pH降低到一定程度时，使顺乌头酸酶和异柠檬酸脱氢酶失活，更有利于柠檬酸的积累及排出细胞外。 第四节 氨基酸和核酸的发酵机制 一、氨基酸发酵机制 1 EMP途径、HMP途径 谷氨酸生产菌存在着两种代谢途径：EMP、HMP ；EMP/HMP=10/90。 2 TCA、DCA和CO2固定作用 a.TCA环（三羧酸循环） b.DCA环（乙醛酸循环） c.CO2固定 PEP+CO2+GDP 草酰乙酸+GDP CO2 丙酮酸 苹果酸 草酰乙酸 CO2 NAD+ NADH+H+ 3、氨的导入 ①α-酮戊二酸还原氨基化→谷氨酸 氨的导入有三种方式 ③谷氨酸合成酶途径 二 细胞膜通透性控制 ①α-酮戊二酸脱氢酶活性极低或缺失 ③细胞膜对谷氨酸的通透性高 谷氨酸发酵机制 第五节 抗生素发酵机制 例1：谷氨酸棒杆菌（生物素缺陷型）生产谷氨酸 PEP Pyr AcCoA OAA akg Glu Mal PC PEP：磷酸烯醇式丙酮酸；Pyr：丙酮酸；AcCoA：乙酰辅酶A；OAA：草酰乙酸； α kg：α -酮戊二酸；Glu：谷氨酸；Mal：苹果酸；PC：丙酮酸羧化酶 生物素是丙酮酸羧化酶的辅酶，生物素在低于亚适浓度之前，增加生物素有利于丙酮酸的羧化产生草酰乙酸，进而有利于谷氨酸的合成； 生物素是催化脂肪酸生物合成的初始酶乙酰辅酶A羧化酶的辅酶，该酶催化乙酰辅酶A羧化生成丙二酸单酰辅酶A，再经一系列转化合成脂肪酸，而脂肪酸又是构成细胞膜磷脂的主要成分，因此生物素可间接地影响细胞膜的透性。 生物素对谷氨酸合成的影响 例2：溶烷棒杆菌GL-21（甘油缺陷型）生产谷氨酸 磷酸二羟丙酮 α-磷酸甘油 磷酯 PGDH 该菌株的α-磷酸甘油脱氢酶（PGDH）缺失，因此不能正常合成α-磷酸甘油和磷酯。影响了细胞膜结构的合成而使得细胞膜透性增大，有利于谷氨酸在菌体外积累。 （二）微生物发酵条件的控制 当菌株确定后，环境条件合适与否是发酵成败的重要因素，环境条件既影响微生物的生长，又影响代谢的速