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一、基因工程的概念 。 二、基因工程的基本工具 1.“分子手术刀”— （1）来源：主要是从 中分离纯化出来的。（2）功能：使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的 键断开.（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 . 2.“分子缝合针”— 。与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。DNA连接酶是连接 的末端，形成磷酸二酯键。 3.“分子运输车”— 。 （1）载体具备的条件：① 。 ② 。 ③ 。 （2）最常用的载体是 ,它是一种裸露的、结构简单的、独立于 ，并具有 的双链 DNA分子。 （3）其它载体： 。 三、基因工程的基本操作程序 第一步： 。 1.目的基因是指： 。 2.人工合成目的基因常用方法有 和 。 第二步： 。 1.组成： ＋ ＋ ＋ 。 （1）启动子：是一段有特殊结构的 ，位于基因的 ，是 识别和结合的部位，能驱动基因转录出 ，最终获得所需的 。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的 ，位于基因的 。 （3）标记基因：是为了鉴定受体细胞中是否含有 ，从而将 筛选出来。常用的标记基因是 。 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是 。 ①农杆菌特点，易感染 植物和裸子植物，而对大多数 植物没有感染力； ②将目的基因导入动物细胞：最常用的方法 。此方法的受体细胞多是 。 第四步： 。 1.首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入 ，方法是采用 。 2.其次还要检测目的基因是否转录出了 ，方法是采用 。 3.最后检测 ，方法是从转基因生物中提取 ，用相应的 进行 。 4.有时还需进行 的鉴定。 * 1.5 基因工程复习课 专题1 基因工程 限制性内切酶 原核生物 磷酸二酯 黏性末端 平末端 DNA连接酶 单个核苷酸 两个DNA片段 自主检测 载体 能在受体细胞中复制并稳定保存 具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入 具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择 质粒 细菌染色体DNA之外 自我复制能力 环状 噬菌体的衍生物、动植物病毒 目的基因的获取 编码蛋白质的结构基因 反转录法 化学合成 基因表达载体的构建 目的基因 启动子 终止子 标记基因 DNA片段 首端 RNA聚合酶 mRNA 蛋白质 DNA片段 尾端 目的基因 含目的基因的细胞 抗生素基因 第三步： 。 1.转化的概念： . 。 将目的基因导入受体细胞 是目的基因进入受体细胞内，并且在受体 细胞内维持稳定和表达的过程 2.常用的转化方法： 农杆菌转化法 单子叶 双子叶 显微注射技术 受精卵 目的基因的检测和表达 目的基因 DNA分子杂