介孔碳纳米粒的表面修饰及其生物相容性研究-中药剂学专业毕业论文.docxVIP

3．2细胞凋亡实验结果 3．2细胞凋亡实验结果 17 3．3 ROS水平的测定结果 19 4．本章小结 20 第三章介孔碳纳米粒的免疫毒性评价 。22 1．实验材料 22 1．1主要仪器设备 ．22 1．2主要材料和试剂 ．22 2．实验方法 23 2．1 小鼠树突状细胞(mDCs)的培养 ．23 2．2 MCN、MCN．PVP、MCN．PEG对mDCs表面分子表达的影响 ．．23 2．3 纳米粒刺激mDCs分泌细胞因子的测定 ．．23 2．4 T淋巴细胞凋亡的测定 23 2．5 RAW264．7细胞对MCN的摄取 24 2．6 RAW264．7细胞的CCK-8实验 24 3．结果与讨论 25 3．1 纳米粒对mDCs表面分子表达的影响 一25 3．2纳米粒刺激mDCs分泌细胞因了．的检测 ．．27 3．3 T淋巴细胞凋亡实验 27 3．4生物透射电子显微镜观察RAW264．7对MCN的摄取 ．．28 3．5 CCK-8法评价纳米粒对RAW264．7的细胞毒性 29 4．本章小结 30 第四章介孔碳纳米粒的生物毒性效应初步研究 ．32 1．实验材料 32 1．1主要仪器设备 ．32 1．2主要材料和试剂 ．32 2．实验方法 32 2．1体外溶血实验 ．32 2．2小鼠体内组织病理学分析 33 2．3小鼠血液生化指标检测 33 2．4小鼠补体C3的检测 34 3．结果与讨论 ． ．．34 3．1 溶血实验检测纳米粒的血液相容性 ．34 3．2病理切片检查结果 ．．34 3．3 血液生化指标检测结果 35 3．4小鼠血清补体C3的变化 ．36 4．本章小结 37 结论 38 TTI 万方数据 参考文献． 参考文献． ．40 致谢 43 文献笔斋述． 。44 作者简历． ．49 IV 万方数据 中文摘要在生物医药领域众多具有应用前景的纳米材料中，碳基纳米材料占据着重要的地位， 中文摘要 在生物医药领域众多具有应用前景的纳米材料中，碳基纳米材料占据着重要的地位， 如碳纳米管、石墨烯和介孔碳材料等，其中介孔碳纳米材料是一类新型具有较大应用潜 能的多孔碳纳米材料。它具有大的比表面积和孔容，能提供高的载药能力；具有可调的 孔径结构和孔隙，可以控制内装药物分子的释放，在药物传送系统领域有较好的应用前 景，然而在用于临床之前，必须充分了解纳米材料的物理化学性质和不良的生理反应， 仔细的评估毒性和生物相容性。前期研究中本课题组成功制备了PEG修饰的氧化介孔 碳纳米粒作为抗肿瘤药物阿霉素(DOXr)的载体，该纳米粒具有良好的亲水性和很高的载 药量，DOX的释放具有pH响应性，同时在体内外具有良好的抗肿瘤活性。其他已有 的研究也表明，在碳纳米材料表面修饰或嫁接某些亲水性分子如聚乙二醇(PEG)或聚乙 烯吡咯烷酮(PvP)，可改善碳纳米材料的分散性和血液稳定性，显著提高载体吸附药物 的能力和在循环系统半衰期，避免网状内皮系统的捕获以防止药物在传递过程中的非特 异性释放，从而提高碳纳米材料的生物相容性。 因此本课题拟在前期工作基础上，用聚乙烯吡咯烷酮(PvP)和二硬脂酰磷脂酰乙酰 胺．甲氧基聚乙二醇2000(DSPE-rnPEG2000)对介孔碳纳米粒进行表面修饰，从细胞水平、 免疫系统作用和整体动物水平研究修饰前后介孔碳纳米粒的生物相容性，为介孔碳材料 未来在临床医药领域的可能应用提供一定的依据。 第一章主要介绍了介孔碳纳米粒的合成、表面修饰及相关表征。我们通过低浓度水 热合成法成功制备了介孔碳纳米粒，透射电镜等检测表明介孑L碳纳米粒为较规则的球形， 粒径均一，约为90 nrn，同时具有良好的有序介观结构。主要依靠介孔碳纳米粒强吸附 作用在其表面进行修饰，并通过透射电镜、傅立叶红外光谱、热重分析、核磁、紫外一 可见分光光度计和马尔文粒径仪等对修饰前后的介孔碳纳米粒进行了较系统的表征，表 明PVP和DSPE．mPEG2000成功的修饰到介孔碳纳米粒的表面，并提高了其在水溶液 中的分散性和稳定性。细胞摄取实验结果表明，介孔碳纳米粒可以在较短时间内(2h)被 正常细胞或肿瘤细胞摄取。 第二章主要是测定了修饰前后介孔碳纳米粒的细胞毒性和对细胞的氧化应激水平 的影响。通过CCK一8实验、细胞凋亡实验、活性氧检测等方法测定表明．在低于100¨#ml 浓度范围内，MCN、MCN—PVP和MCN．PEG与L929细胞共孵育24h时，MCN表现 出轻微的细胞毒性，而PVP和DSPBn】PEG2000对MCN的表面修饰能降低其对L929 V 万方数据 细胞的毒性；而48h时，不同浓度的MCN细胞存活率有所提高，说明MCN本身对L929 细胞的毒性；而48h时，不同浓度的MCN细胞存活率有所提高，说明MCN本身对L929 细胞的毒性较低。修饰和未修饰的介孔