膝关节骨关节炎研究进展.pptVIP

骨关节炎的危险因素 临床表现 膝关节骨性关节炎的病因研究 膝关节骨性关节炎的病因研究 各种机械性刺激是软骨细胞功能的重要调节因素，它不仅能诱导包括白细胞介素1-β、一氧化氮和金属蛋白酶等炎症因子的产生，而且能导致蛋白聚糖从软骨组织块中释放。 膝关节骨性关节炎的病因研究 膝关节骨性关节炎的病因研究 膝关节骨性关节炎的病因研究 膝关节骨性关节炎的病因研究 海桐皮汤熏蒸对兔实验性膝骨关节氧自由基代谢和软骨细胞凋亡的影响 赖 震 石仕元 费 俊 等 杭州市红十字会医院 实验内容一 海桐皮汤熏蒸对兔实验性膝骨关节炎软骨显微结构的影响 材料与方法 1. 药物 海桐皮汤: 海桐皮，透骨草，乳香，没药，当归，防风，红花，川芎，威灵仙，川椒，白芷，桂枝组成。 2.主要仪器设备 RTZ-l0A型台秤、 66805电针治疗仪、 低温冰箱(BS-812)、 电子天平(AX-6901)、LKB800超薄切片机(德国)、 JSM-840 、OlymPus光学显微镜(日本) 3.实验动物 45只新西兰大白兔，雌雄不限，体重为（体重2.0～3.5kg）由浙江中医药大学实验中心提供，批号:SYXK(浙)2008-0116，普通级。 4.制作熏蒸台 熏蒸时将实验兔置于熏蒸台，台下放电饭煲以熏蒸之用。 材料与方法 图1 实验动物称重图 2 熏蒸架 图3对实验兔进行熏蒸 造模方法 每只动物随机选取右侧膝关节，参考 Hulth 造模方法，取膝关节内侧纵切口长约 4cm，探查关节腔无原发病变后仔细切断前交叉韧带和后交叉韧带，切断内侧副韧带，完整切除内侧半月板(勿损伤关节软骨面)，逐层缝合伤口，无菌敷料包扎固定。 分组与治疗 随机取10只实验兔作为正常对照组(A 组)， 其余35只采用 Hulth 方法造模，取30只造模后无明显不良反应的实验兔并随机分为 模型组(B 组)、水蒸气熏蒸组(C组)和海桐皮汤熏蒸组（D组）。 模型组：造模后正常饲养。 水蒸气熏蒸组：用自来水熏蒸，将实验兔固定在熏蒸台上(距离熏蒸锅30cm)熏蒸30分钟，每日一次，共4周。 海桐皮汤熏蒸组：取海桐皮汤熏蒸，将每副中药在治疗前浸泡半小时后，放入电饭锅通电加热至煮沸冒蒸汽为止。同时熏蒸30分钟，每日一次，共4周。 切片的制备及观察 关节蜡块，常规制片，HE染色，由病理专业人员阅片，关节软骨有无破坏或纤维化。 根据病变由轻到重的程度，依次半定量为轻微(±)，轻度(＋)，中度(＋＋)，重度(＋＋＋)，无病变组织为阴性（—）。 统计学分析 应用SPSS13.0软件进行统计学处理，数据以均数±标准差（ ±S）表示。组间比较时，方差齐性者，采用单因素方差分析，方差不齐者，比较采用非参数检验和Dunnett-t检验；组内前后比较时，采用单样本t检验，均以P0.05作为显著性差异的标准。 结 果 造模情况 在造模过程中出现2只实验兔手术后死亡，手术1周后出现2只实验兔膝关节感染，处死后，解剖右膝关节发现膝关节内有大量脓液及坏死组织。 其余实验兔膝关节无明显异常。 大体观察 各组按相应方法处理4周后，膝关节无明显红肿，各组体重无显著差异（见表1）， 解剖右膝关节后，正常组和海桐皮汤熏蒸组关节软骨无明显区别，色泽正常，均无肉眼可见关节软骨裂隙，软骨下骨裸露和关节周缘骨赘形成。 模型组和水蒸气熏蒸组肉眼可见部分关节软骨裂隙，软骨下骨裸露。 光镜观察 1）正常组：关节面光滑，表面被覆薄层透明软骨，细胞排列整齐，关节骨组织结构清晰，无骨折、坏死。 2）模型组：10只中8只有炎症性病变和软骨破坏，滑膜增厚，软骨表面糜烂，细胞成簇排列，其余2只软骨有不同程度的破坏，并且有炎细胞浸润，局部纤维组织增生，骨组织基本正常。 3）水蒸气熏蒸组：关节软骨炎性病变较模型组减轻，轻微炎细胞浸润，膝关节软骨细胞数增多，软骨细胞排列较整齐，基质囊变好转，基质纤维变性减轻。 4）海桐皮汤熏蒸组：关节软骨炎性病变较模型组减轻，膝关节软骨细胞数增多，软骨细胞排列较整齐，基质囊变好转，基质纤维变性减轻。另1只滑膜组织及关节软骨、骨组织基本正常。见表 2，图12-15。 各组关节软骨观察情况 实验内容二 海桐皮汤熏蒸对兔实验性膝骨关节炎氧自由基代谢的影响 材料与方法 1 .主要试剂 乳酸林格氏液、0. 9%生理盐水、0. 3%肝素溶液、无菌蒸馏水、冰醋酸、3%戊巴比妥钠、丙二醛（MDA）测试盒、超氧化物岐化酶（SOD）测试盒 2.主要仪器设备 家兔手术台、动脉插管、三用恒温水浴箱 、