免疫抑制小鼠急性重症肺部感染中巨噬细胞亚型变化与乌司他丁调控.PDF

·46· 实用器官移植电子杂志  2016年1月第4卷第1期  Pract J Organ Transplant（Electronic Version）， January 2016，Vol.4，No.1 ·论著· 免疫抑制小鼠急性重症肺部感染中巨噬细胞 亚型变化与乌司他丁调控效应 秦科 ，邝晓聪 ，孙煦勇 ，董建辉 ，蓝柳根 ，黄莹 ，曹嵩 ，李美思 ，李壮江 ，1 2 1 1 1 1 1 1 1 李海滨1，苏庆东 ，周洁惠 （1. 广西南宁中国人民解放军第303医院移植医学研究院，1 1 广州军区器官移植中心，广西移植医学重点实验室，广西移植医学工程技术研究中心， 广西 南宁 530021；2. 广西医科大学基础医学院，广西 南宁 530021） 【摘要】 目的 探讨免疫抑制状态下重症肺部感染小鼠肺巨噬细胞亚型变化情况，观察乌司他丁（UTI ） 干预的巨噬细胞调控效应，初步明确其拮抗重症肺部炎症的作用机制。方法 选取60只Balb/c 小鼠，分为 对照组、模型组和乌司他丁组，每组20只小鼠；其中模型组采用腹腔注射甲泼尼龙 （30 mg/kg ），气管内滴 注内毒素 （10 mg/kg ）制备免疫低下急性重症肺部感染小鼠模型 ；乌司他丁组则在建模前后腹腔注射乌司 他丁 （1×105 U/kg ）干预 ；主要观察小鼠呼吸情况、肺泡灌洗液炎性细胞构成、肺组织病理改变与评分以 及M1和M2巨噬细胞等指标，采用免疫组化法检测肺组织M2巨噬细胞的CD163表达，采用实时定量PCR 检测肺泡灌洗液细胞中M1巨噬细胞分泌分子肿瘤坏死因子- α（TNF- α）、白细胞介素-6 （IL-6）、诱 导型一氧化氮合成酶 （iNOS ）和M2巨噬细胞标志与分泌分子CD206、Arg-1、IL-10 的mRNA 表达水平。 结果 模型组和乌司他丁组小鼠一般情况较差，部分小鼠出现呼吸窘迫现象，其中模型组小鼠肺泡腔与间 质炎性细胞浸润，肺间质增宽，乌司他丁组病变减轻，与模型组相比，肺损伤评分显著降低 〔（肺损伤评分 （分）：6.77±0.85 比8.21±0.92，P ＜0.05〕，乌司他丁组与模型组肺泡灌洗液中中性粒细胞比例显著增高， 但两组差异不大。除iNOS 外，M1和M2巨噬细胞相关分子均高于对照组，与模型组相比，乌司他丁组M1 巨噬细胞相关分子TNF- α、IL-6以及M2巨噬细胞相关分子IL-10、CD206 均显著降低 〔TNF （2- ΔΔCt ）： 0.42±0.18 比0.76±0.12，IL-6 （2- ΔΔCt ）：0.72±0.26 比1.22±0.32，IL-10 （2- ΔΔCt ）：3.91±1.35 比6.84±2.13， CD206 （2- ΔΔCt ）：0.61±0.91比0.92±0.31，均P ＜0.05〕，而iNOS 和Arg-1则与模型组无显著差别。此 外，免疫组化染色检测乌司他丁组肺组织M2巨噬细胞的CD163表达，其结果明显低于模型组 〔CD163 （A ） 值 ：31 430.0±2 417.97 比69 855.0±6 489.5，P ＜0.05〕，但高于对照组。结论 在辅助T 细胞Th 1单向偏 移Th2免疫抑制状态中，重症肺部感染的巨噬细胞呈M1偏向M2亚群优势活化的状态，乌司他丁则可能通 过调控M1与M2亚群再平衡来发挥其抗炎效应。 【关键词】 免疫抑制 ； 小鼠； 重症肺部感染 ； 巨噬细胞 ； UTI Alterations of macrophage subsets and the regulation of Ulinastatin in the immunosuppressed mouse with severe pulmonary infection Qin Ke ，Kuang Xiaocong ，Sun Xuyong ，Dong Jianhui ，Lan Liugen ，Huang Ying ，Cao Song ，Li Meisi ，Li Zhuangj iang ，Li Haibin ，Su Qingdong ，Zhou Jiehui. 1. Institute of Transp la