红车轴草提取物定量测定方法的优化-天津中草药杂志社.PDF

中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 42 卷 第 10 期 2011 年 10 月 ·1989 · 红车轴草提取物定量测定方法的优化 1 2 2 1 1* 张 念 ，周 威 ，许汉林 ，孔德云 ，华茉莉 1. 上海医药工业研究院，上海 200040 2. 湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065 摘 要：目的 优化红车轴草提取物的定量测定方法，以客观有效地评价提取物的质量。方法 以鹰嘴豆芽素A 、染料木素、 刺芒柄花素和大豆苷元 4 种异黄酮苷元作为定量测定的指标成分，采用 HPLC 法分别测定提取物酸水解前后异黄酮的量。 结果 通过系统的研究与优化，确定的色谱条件为：Capcell pak C18 柱（150 mm×4.6 mm ，5 μm ），柱温 30 ℃，检测波长 254 nm，体积流量 1.0 mL/min，以乙腈（含 0.05% TFA ）-水（含 0.05%TFA ）梯度洗脱；酸水解条件为：提取物以 1 mol/L 盐酸甲醇溶液（每毫克提取物样品加 2.0 mL ）于85 ℃水浴回流 1.5 h，冷却至室温后定容待测。结论 本方法为红车轴草 提取物提供了一种简便快速、有效可靠的定量测定方法。 关键词：红车轴草；异黄酮；鹰嘴豆芽素 A ；染料木素；刺芒柄花素；大豆苷元；HPLC 中图分类号：R286.02 文献标志码：B 文章编号：0253 - 2670(2011)10 - 1989 - 05 Optimizmum quantitation determination of extract from Trifolium pratense 1 2 2 1 1 ZHANG Nian , ZHOU Wei , XU Han-lin , KONG De-yun , HUA Mo-li 1. Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry, Shanghai 200040, China 2. College of Pharmacy, Hubei University of Traditional Chinese Medicine, Wuhan 430065, China Key words: Trifolium pratense L.; isoflavone; biochanin A; genistein; formoononetin; daidzein; HPLC 红车轴草 Trifolium pratense L.为豆科多年生草 黄素 B 、鹰嘴豆芽素B ）、鹰嘴豆芽素A （biochanin 本植物，又名红三叶草、红花苜蓿[1] ，因植物中含 A ，又称鸡豆黄素 A 、鹰嘴甲素）为指标成分，直 有较为丰富的异黄酮[2] ，其提取物已被全球广泛应 接测定提取物中各指标成分的量；美国国家标准则 用于各种保健品或饮食增补剂中，用于预防乳腺癌、 将提取物酸水解，与法定标准提取物对照后，以刺 改善骨质疏松、妇女更年期综合症等[3-8]，许多国家 芒柄花素为基准物按不同的换算因子分别折算鹰嘴 因此将其纳入法定标准，美国药典- 国家处方集的饮 豆芽素 A 、染料木素（genistein ）、刺芒柄花素、大 食增补剂分册（Botanical Official Monographs in 豆黄素（daidzein，又称大豆苷元、大豆素）的量。 USP30-NF25 ）就收载红车轴草及其提取物的质量标 就化学结构而言，刺芒柄花苷为刺芒柄花素的 准。我国目前尚未建立红车轴草相关产品的国家标 单糖苷，印度黄檀苷为鹰嘴豆芽素 A 的单糖苷，化 准，但每年对欧美市场出口大量的红车轴草提取物，