甾体激素类题药物的分析4.ppt

第十章 甾体激素类药物的分析 Analysis of steroid hormones 有机氟 Fˉ 有机破坏 有机氯 5、卤元素的呈色反应 茜素氟蓝—硝酸亚铈 硝酸—硝酸银 呈蓝紫色 Clˉ AgCl 氯原子结合在母核环上 6、沉淀反应 （1）与碱性酒石酸铜（斐林试液）的沉淀反应 （2）氨制AgNO3（多伦试液）的沉淀反应 （3）与AgNO3的沉淀反应 适用：含炔基的甾体激素类药物（炔雌醇、炔诺酮）。 机理： ↓ HNO3 + + NaOH滴定，电位法指示终点 （4）与HNO3-AgNO3的沉淀反应 适用：甾体激素类药物C21位上有氯原子取代，如丙酸氯倍他索。 机理： 有机氯原子 水解 加热 无机氯原子 结合在母核 环上的氯原子 氧瓶燃烧法 破坏 无机氯原子 硝酸—硝酸银 AgCl 原理：一些甾体激素类药物具有醋酸酯、戊酸酯及已酸酯的结构，可先行水解，根据水解产物来鉴别。 7、水解产物的反应 适用： 本类药物C3、C17或C21位上羟基的酯 结果： 醋酸酯水解后生成的醋酸可与乙醇反应，生成有香气醋酸乙酯。 戊酸或己酸酯类水解后可生成有特臭的戊酸或己酸，进行鉴别。 三、制备衍生物测熔点 （二）酯的水解 醇制KOH 水解 m.p.为150℃~ 156℃ （一）酯的生成 + KOH 丙酸睾丸素 睾丸素 m.p.为201℃ + m.p.约182℃（分解） （三）缩氨基脲的生成 苯丙酸诺龙 苯丙酸诺龙缩氨脲 H2NCONHNH2 （四）酮肟的生成 炔诺酮 HONH2 炔诺酮肟 m.p.约195℃（分解） 醋酸泼尼松 △４-3-酮 （五）UV-ViS分光光度法 240nm左右 280nm左右 苯环 其他共轭结构 原 理 200-760nm有特征吸收。 方 法 可规定最大吸收波长、A、吸收系数、A大/A小。 示 例 在239nm处有最大吸收，A为 0.57～0.60，在239nm与263nm 处的吸收度比值为2.25～2.45 在238nm处有最大吸收 结果判断 20μg/ml 20μg/ml 浓度 乙醇 甲醇 溶剂 丙酸倍氯米松 曲安息龙 结构特征： 酚羟基 C17 –OH C17 –乙炔基 eg1:炔雌醇 （六）IR法 原料药 1505cm-1 3505cm-1 3300cm-1 ν 1590cm-1 3610cm-1 酚羟基 醇羟基 1615cm-1 苯环的骨架振动 eg2：黄体酮 △４-3-酮 结构特征： C17-酮基 1700cm-1 ?C=O 20位酮基 1665cm-1 3位酮基 1615cm-1 870cm-1 ?C-H 双键 结果判断 方法 应用 要求在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的tR与对照品峰的tR一致 要求供试品溶液所显主斑点的颜色和位置与对照品溶液的主斑点相同 对照品法 对照品法 甾体激素类药物原料与制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏） 甾体激素类药物原料与制剂的鉴别 八、HPLC 七、TLC法 第三节 特殊杂质检查 杂质来源：原料、中间体、异构体、降解产物以及试剂和溶剂。 一、有关物质的检查 其他甾体：有些杂质与该甾体激素药物结构类似，也具有一定的药理作用而又互不相同，因此在甾体激素类药物的质量控制中，“其他甾体”的限度检查显得很重要。 检查方法：（具有一定分离能力） 判定方法：规定杂质斑点数目 规定杂质斑点颜色 1、TLC法（自身对照法） eg：氢化可的松中其他甾体的检查 供试液：本品+氯仿-甲醇（9：1） 浓度：3.0mg/ml 对照液：供试液（3.0mg/ml）+氯仿-甲醇（9：1） 60μg/ml 层析：供试液 对照液 点样、展开、斑点检出。 判断：供试液如显杂质斑点，不得多于3个，其颜色与对照液的主斑点比较，不得更深。 2、HPLC法（自身对照法） ≤图A中峰1面积的四分之三 判定方法： 规定杂质峰数目 规定杂质峰面积 二、游离磷酸盐的检查 方法：对照品比色法 杂质来源：地塞米松磷酸钠生产过程中，由磷酸酯化时残存的过量磷酸盐。 结果判断：供试品溶液的吸光度不得大于对照溶液的吸光度。 740nm 原理：供试液+钼酸铵+1-氨基-2-萘酚-4-磺酸 钼蓝 三、有