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本章教学目的与要求 了解:细胞周期长短测定、同步化 特殊的细胞周期 掌握:细胞周期 细胞周期中各个不同时相及其主要事件 有丝分裂、减数分裂的过程 细胞周期的调控 重点:细胞周期中各个不同时相及其主要事件 有丝分裂、减数分裂的过程 细胞周期的调控 难点:细胞周期运转中各种周期蛋白依赖性 CDK激酶在细胞周期调控中的作用。 细胞增殖的意义 2.更新衰老、凋亡细胞和受损组织 第一节 细胞周期概述 cell cycle 细胞周期 从一次细胞分裂结束开始,经过物质积累过程,直到下一次细胞分裂结束为止,称为一个细胞周期(cell cycle)。 细胞周期 细胞周期长短 细胞周期时间长短主要差别在G1期。 小鼠食管上皮细胞T=115h G1=103h 十二指肠上皮细胞T=15h G1=6h 自然同步化: 黏菌的变形体plasmodia-核分裂而不进行胞质分裂。 五、特殊的细胞周期 1.早期胚胎细胞的细胞周期 (从第2次卵裂到第12次卵裂)G1期和G2期非常短,以至认为早期胚胎细胞仅含S期和M期。 2.酵母细胞的细胞周期 芽殖酵母和裂殖酵母-4个时相 核膜不分裂,纺锤体位于细胞核内 3.植物细胞的细胞周期 4个时相 不含中心体,纺锤体装配微区启动,细胞板胞质分裂 4.细菌的细胞周期 慢速生长 快速生长 35min? (70min) 有丝分裂 前期(Prophase) 前中期(Prometaphase) 中期(Metaphase) 后期(Anaphase) 末期(Telophase) 胞质分裂(Cytokinesis) 着丝粒:连接两个染色单体形成有丝分裂染色体的主缢痕部位。(着丝粒DNA) 动粒:前期的较晚时期,在着丝粒处逐渐组装一种蛋白质复合体结构。 星体:中心体与其周期的微管一起称为星体。 动粒微管解聚 植物细胞 第三节 细胞周期的调控 MPF的发现及其作用 Maturation-promoting factor 卵细胞促成熟因子/成熟促进因子 M phase-promoting factor M期促进因子 G2期 M期 1970、1972、1974 Rao和Johnson Hela细胞 M期细胞 M期HeLa细胞与G1、S和G2期小鼠细胞融合诱导PCCPCC-早熟染色体凝集 1971年,Masui和Markert用非洲爪蟾卵做实验 MPF分离纯化 MPF MPF活性 1970s, Paul Nurse等人以裂殖酵母为实验材料,发现了许多细胞周期调控基因(cdc gene,cell division cycle)。 温度敏感型突变株[temperature-sensitive(ts)mutants] 基因 蛋白质 cdc2 p34cdc2 (分子量34KD) cdc28 p34cdc28 (分子量34KD) p34cdc2+ p56cdc13 激酶活性 p32与p34cdc2 为同源物 p45与p56cdc13 ? 周期蛋白(cyclin) p34cdc2激酶、周期蛋白与MPF关系? MPF纯化: 1988 (Xenopus egg非洲爪蟾卵) MPF=32kD+45kD MPF具有蛋白激酶活性 MPF 4种类型周期蛋白 周期蛋白框(cyclin box):一段相当保守的氨基酸序列(100Aa),介导与CDK结合。 破坏框(destruction box):9Aa 周期蛋白依赖性蛋白激酶(cyclin-dependent kinase,CDK) 概念: 含有一段类似的氨基酸序列(PSTAIRE),可以与周期蛋白结合,并将周期蛋白作为其调节亚单位,进而表现出蛋白激酶活性。 P428 CDK激酶抑制物(cyclin-dependent kinase inhibitors,CDKI/CDI) 概念 细胞中还具有细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子(CDK?inhibitor,CKI)对细胞周期起负调控作用 。 ①INK4(Inhibitor of cdk 4):如p16ink4a、p15ink4b、p18ink4c、p19ink4d,特异性抑制CDK4·cyclin D1、CDK6·c
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