免疫学微生物学检验(高护2014年).ppt

* 标本采集 检验方法和操作流程 1. 涂片检查（先培养后涂片） 2. 分离培养 3. 报告方式 同痰标本检查。 * 白喉杆菌Albert染色 * 白喉杆菌Neisser染色 * 白喉杆菌亚碲酸钾血平板菌落 * 百日咳鲍特菌革兰染色 * 百日咳鲍特菌菌落特征（CCBA琼脂） * （四）穿刺液标本 穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等）。 正常穿刺液是无菌的，若从患者穿刺液中查见致病菌或条件致病菌提示该部位有细菌感染。 胸腔感染的病原菌以结核分枝杆菌多见：腹腔感染的病原菌以肠道细菌如大肠挨希菌、粪肠球菌，以及结核分枝杆菌多见：心包炎和关节腔液以金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌多见。 * 标本采集 检验方法和操作流程 1. 涂片检查（先接种后涂片） 2. 分离培养 （1）普通细菌培养： （2）厌氧菌培养 （3）结核菌培养 3. 报告方式 培养48h无细菌生长，报告“培养2 天无细菌生长”。查见细菌，报告菌名和药敏结果。 * 穿刺液标本细菌学检验方法和操作流程 * 大肠埃希菌革兰染色 * 大肠埃希菌菌落特征（血平板） * 大肠埃希菌菌落特征（MAC） * 大肠埃希菌KIA（AA＋－）MIU（＋＋－） * 大肠埃希菌IMViC试验（＋＋－－）右侧为对照（－－＋＋） * （五）泌尿、生殖道标本 尿液标本 中段尿培养加计数对于泌尿道感染的诊断有重要价值。细菌培养必须结合菌落计数辨别是否为病原菌。 有致病菌或条件致病菌生长，菌落计数105/ml，提示感染（膀胱炎，肾盂肾炎、肾或膀胱结核等）。 常见病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、链球菌、变形杆菌和伤寒沙门菌等。 * 标本采集 1. 中段尿标本采集法 （1）女性：女性月经期间容易污染，不宜采集。 （2）男性 （3）儿童、婴儿 （4）两侧肾盂尿 （5）膀胱穿刺 * 检验方法和操作流程 1.涂片检查 （1）一般细菌及淋病奈瑟菌 （2）念珠菌 （3）结核分枝杆菌 * 2.一般细菌培养 如培养2d无细菌生长，即可弃去。采用定量培养的方法进行尿液菌落计数区别污染和病原菌。一般认为尿液中的菌落数105/ml为病原菌，104/ml为污染菌，105/ml 104/ml为可疑需重新复查，重新复查后仍为同样结果，则应视为病原菌。会受到尿量、尿液在膀胱中停留的时间长短及使用利尿剂等影响。计数的方法有： （1）倾注平板法 （2）标准接种环法：若定量接种环含量为.001ml，则整个平板菌落数超过100个，可报告“菌落数105/ml”。 * 变形杆菌革兰染色 * 变形杆菌鞭毛染色 * 变形杆菌迁徙生长现象（普通琼脂平板） * 变形杆菌菌落特征（MAC） * 变形杆菌KIA（K A+ + ）MIU（+ +/- +） * 粪肠球菌革兰染色 * 粪肠球菌菌落特征 * 培养瓶中有细菌生长时的不同表现。 * 3. 报告方式 培养7d无菌生长者报告“培养7d无菌生长”。查见细菌报告菌名和药敏结果。 4. 菌血症、败血症的诊断标准 1）两次培养均出现同一种细菌（可排除污染）； 2）发病星期后血中抗体滴度上升。 * 葡萄球菌革兰染色葡萄球菌是一群革兰阳性球菌，通常排列成不规则的葡萄串状 * 金黄色葡萄球菌菌落特征（血平板） * 表皮葡萄球菌菌落特征（血平板） * 腐生葡萄球菌菌落特征（血平板） * 金黄色葡萄球菌菌落特征（高盐甘露醇平板） * 触酶试验（阳性） * 糖发酵试验（葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、阴性对照） * （玻片法） （试管法） 血浆凝固酶试验 * 新生霉素敏感试验 * 胶乳凝集试验 * （二）脑脊液标本 脑脊液的细菌学检查对于细菌性脑膜炎的诊断有重要价值。 正常人的脑脊液是无菌的，检出细菌提示有细菌性（急性化脓性、结核性等）脑膜炎。 常见的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、链球菌（A、B群和肺炎链球菌）、葡萄球菌、产单核细胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。 * 标本的采集 脑脊液无论涂片或培养必须于采集后立即送检不宜将其置于冰箱保存，否则影响检出率。应在35℃保温运送。 * 脑脊液标本细菌学检验方法和操作流程图 * 检验方法和操作流程 涂片检查 (1) 一般细菌涂片检查： 革兰阴性、凹面相对的球菌，可能是脑膜炎奈瑟菌； 链状排列的革兰阳性球菌； 长丝状等多形态性的革兰阴性杆菌，可能是流