植物染色体F-BSG分带方法与带型-遗传.PDF

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遗传 HEREOITAS(Beijing) 4(3);25-281982 植物染色体F-BSG分带方法与带型” 朱凤绥: 田自强 程尧楚 r中画农业科学院作物育种城培所,北京) 湖(南农学院,长沙) 植物染色休显示C一带,最习用的分带技术 晚前期及中期。 是BSG法 B(ariumhydroxide-Saline-Giemsa)o 2.前低渗:0.075M的KCl溶液18-78QC 在巳查见的国外150多篇报道和近3年国内的 处理20分钟,燕馏水洗净。 18篇报道内巳有”几种植物染色体分带成功, 3.酶解:2.5务果胶酶及2.5%纤维素酶的 但对我国的许多重要农作物,特别是染色体较 混合溶液调整pH值5-5.5,18-2800酶解至 小.数目较多,分带较难的植物,未见分带报道。 根尖的分生组织 乳‘白色)接近脱落为度,一般 我们参考 Kura。等1978年创用的酶解火焰千 植物处理,小时;油菜、黄麻、西瓜、高粱、粟等 操制片方法,再进行 BSG法处理,1979年在水 根尖幼嫩,处理时间1-2小时;茶、大豆、向日 稻上分带成功,并取名F-B%法 f(lamedrying- 葵等的主根比较粗硬,处理时间延长至斗一,小 RSG)。此后又应用此技术流程,陆续对粮食、 时;侧根的处理时间可减少。 油料、纤维、果树、蔬菜、绿肥、茶、药材等50属 4.后低渗:蒸馏水 18-289C,处理20分 67种作物和林木进行分带实验,效果良好。 钟。 一()F-BSG 法的技术流程 ,.固定保存:甲醉冰醋酸 3(:1)固定保存, 1.取材和预处理:根据实验需要,可分别 可以当时制片,也可以在冰箱中保存,一个月内 取材于种子根、幼穗、幼芽、试管苗的幼根和愈 随时取用制片。 伤组织等,经0.002bf8-经基唆琳 <18℃分别 6.火焰制片:截取分生组织置干载玻片 处理1.5-6小时,使许多有丝分裂细胞积累于 上,在甲醉冰醋酸固定液中用镊柄捣碎,再滴加 固定液,在酒精灯上火焰烤千。 7.变性处理:5务Ba(OH)a溶液,18- 200C处理20分钟,用,0-6000温水漂净钡膜, 并多次冲洗。 8.复性处理:2XSSC(0.3MN2CI十。.n3材 Na3CH507)溶液在60℃中温浴1小时,蒸馏水 洗净,千燥。 9.染色:用 SSrenson缓冲液,pH值6.8, 稀释10%Giemsa染液,把染色体带纹染成紫 ZhuF-gsuietat-:F-BSGRandingandItsPattern inChromosomeofPlants l)溯南农学院魏文娜、贫延确,湖南农科院徐攀瑞、抓平 安,中国农科院麻类所何广文、肖瑞芝、李树川,吉林农 大研究生朴铁夫和中国农科院作物所傅骏华、李连城 图1 黑麦染色体 2(n=14)显示末端带,核仁

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