重庆辣椒病毒病的病原鉴定及多重rt是-pcr检测体系的构建.docxVIP

Southwest Southwest University M．Sc．Dissertation The identification and multiplex RT--PCR detection of pepper virus ●。～’ disease in C hongqing C andidate：Ya Huang Supervisor：Ling Qing Speciality：Phytopathology Research Field：Molecular Phytopathology Southwest University,Chongqing，China April，2015 万方数据 独创性声明学位论文题目：重迭速塑痘麦痘的痘厦鉴廑丞垒重坠￡￡B捡测佳 独创性声明 学位论文题目：重迭速塑痘麦痘的痘厦鉴廑丞垒重坠￡￡B捡测佳丕邋 本人提交的学位论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。论文中引用他人已经发表或出版过的研究成果，文中已加了 标注。对本研究及学位论文撰写曾做出贡献的老师、朋友、同仁在文 中作了明确说明并表示衷心感谢。 学位论文作者：名、岔豇 签字日期：2015 Z月8日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解西南大学有关保留、使用学位论文的规 定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允 许论文被查阅和借阅。本人授权西南大学研究生部可以将学位论文的 全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫 描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文：口不保密，口 保密期限至 年 月止)。 粼，鬻嚣案日戮铭签字日期：伽(￡年||(月易日 签字日期：“I年易月Iil日日 万方数据 目录目 目录 目 录 摘要 I Abstract ．．．． ．．．．．．． ．．．．．．，．． ． ．．．． ．．．．．．．， ． ．．．．．．．．． ．．．．．．． ．．．．．． ．．．．．．．． ．．．．．．．．．．．．．．III 第一章文献综述 1 1国内外辣椒病毒病毒源种类及危害 l 1．1黄瓜花叶病毒 ．2 1-2烟草花叶病毒 ．．2 1．3马铃薯Y病毒 ．3 1．4烟草蚀纹病毒 ．3 1．5马铃薯x病毒 3 l，6苜蓿花叶病毒 ，4 1．7蚕豆萎蔫病毒2号 ．4 1．8辣椒轻斑驳病毒 ．4 1．9辣椒脉斑驳病毒 ．5 1．10番茄斑萎病毒 5 2重庆辣椒病毒病研究现状 6 3辣椒病毒检测及鉴定技术 6 3．1生物学方法 ．6 3．2电镜观察法 7 3．3血清学方法 一7 3．4分子检测法 一8 4本研究的目的与意义 8 第二章重庆辣椒病毒病样品的Dot．ELISA检测 ，．11 1材料与方法 ．1l 1．1材料 ．．11 1．2方法 11 2结果与分析 ．12 2．1辣椒病毒病的主要症状 12 2．2辣椒样品的Dot—ELISA检测 12 2．3不同年份采集样品的病毒检出率比较 15 3．讨论 ．15 第三章辣椒病毒的分子鉴定 一19 1材料与方法 ．19 1，1材料 ．．19 1．2方法 ．．20 2结果与分析 ．．23 2．1辣椒轻斑驳病毒的分子鉴定 23 2．2辣椒脉斑驳病毒的分子鉴定 25 2_3马铃薯Y病毒的分子鉴定 27 2．4番茄斑萎病毒的分子鉴定 30 2．5芜菁花叶病毒的分子鉴定 32 3讨论 j， 万方数据 西南大学硕士学位论文第四章五种辣椒病毒的多重RT-PCR检测体系的建立及应用 西南大学硕士学位论文 第四章五种辣椒病毒的多重RT-PCR检测体系的建立及应用 37 1材料与方法 37 1．1材料 ．．37 1．2方法 ．37 2结果与分析 39 2．1多重RT-PCR反应体系的优化 ．39 2．2多重RT-PCR扩增条件的优化 40 2-3多重RT-PCR体系检测灵敏度的测定 ．40 2．4应用多重RT-PCR检测田间样品 40 3讨论 一42 结论与展望 43 1结论 ．43 2展望 ．．43 参考文献 。45 附录A本论文所用病毒缩写及中英文对照 51 附录B本论文所用缩写词及中英文对照 52 附录C常用生化及分子生物学试剂与仪器 53 附录D常用试剂的配制 54 致谢 55 万方数据 曼皇mi 曼皇mi 摘要 l量曼曼曼曼曼曼曼曼曼喜曼皂!曼曼曼曼曼皇曼曼曼舅曼曼曼曼曼量曼曼量暑舅曼曼曼曼皇曼曼曼曼曼曼皇曼曼曼曼詈詈詈詈詈詈喜—■■—曼量曼量 重庆辣椒病毒病的病原鉴定及多重 RT-PCR检测体系的构建 硕士研究生：黄娅 指导教师：青玲 摘要 重庆是我国辣椒的主产区和集中消费区之一，近年来辣椒病毒病危害严重， 严重影响产量和品质。为了弄清辣椒病毒病的主要毒原，本研究分