药物分析第九章维生素类药物的分析.ppt

第九章　维生素类药物的分析The Analysis of Vitamines §9.1 维生素A的分析 一．结构与性质 VA含有共轭多烯醇侧链的环已稀(有多种异构体) 二. 鉴别试验 1.?三氯化锑反应 三．含量测定 §9.3 维生素C的分析 化学结构 二、鉴别试验 1、硝酸银反应 烯二醇基—还原性。 操作： 二、鉴别试验 1、硝酸反应：（药典收录） VE + HNO3 ----水解生成生育酚-----生育红（橙红色） 本品，无水乙醇溶解，加硝酸，75℃加热约15分钟，显橙红色。 2、水解后氧化反应： 本品，在碱性条件下水解，得α—生育酚，在联吡啶和三氯化铁试液的作用下，反应产生血红色配离子。 VE+KOH – α生育酚（加入三氯化铁）--生育醌 + 铁配合物 （血红色） 3、UV吸收： VE的0.01%无水乙醇液： λmax=284nm λmin=254nm 1、铈量法 原理： VE用硫酸加热回流，水解成生育酚，用硫酸铈定量地氧化为对一生育醌，过量的硫酸铈氧化二苯胺指示剂而指示滴定终点。 终点：亮黄→灰紫 ，需作空白试验。 反应条件： （1）VE在H2SO4酸性条件下水解为宜。 碱性溶液中游离生育酚易被氧化。Ce(SO4)2液滴定在酸性溶液中进行,如在碱性中会生成碱式盐而影响测定。 2、气相色谱法：Chp2000 （1）色谱条件及系统适应性试验 色谱柱：2m×4mmI.D.硼硅玻璃柱， 内装硅藻土（80~100目） 固定相：硅酮（OV-17） 涂布浓度 2% 载气：N2， 流速:含2%固定相：以18~20分钟为宜； 含5%固定相：以30~32分钟为宜 （2）溶液配制： 内标溶液：正三十二烷的环己烷溶液 （1.0mg/ml） 对照溶液：对照品溶解于内标溶液中 (1mg/ml) 供试品溶液：供试品约50mg，用内标溶液，溶解并稀释至50ml 3、高效液相色谱法 日本药局方（JP13） 色谱条件： 柱：ODS 流动相：甲醇—水(49:1) 检测波长：292nm 对照品法定量 （1）环己烯+共轭多烯侧链； （2）天然VA侧链为全反式； （3）天然来源主要是鱼肝油，为醋 酸酯，棕榈酸酯等,目前多由人 工合成。 a.?紫外吸收 ＊具有共轭多烯侧链—紫外吸收。 ＊最大吸收波长在325~328nm，随VA存在状态以及所用的溶剂，最大吸收波长的位置有所不同 ＊ 不溶于水 ＊ 溶于乙醚，氯仿，异丙醇，环己烷，脂肪和油。 ★ 鉴别 ★ 含量测定 2. 结构特点： ☆ a.氨基嘧啶—次甲基—噻唑环季铵化合物 ☆ b.碱性基团： 嘧啶环上的氨基 可与酸成盐 噻唑环上的季铵 3. 性质： ①?? 硫色素反应 VB1噻唑环在碱性条件下可被铁氰化钾K3Fe(CN)6等一些氧化剂氧化后，与嘧啶环上的氨基缩合成具有荧光的硫色素。 ②?? 沉淀反应 VB1的含氮杂环，能和生物碱沉淀试剂反应产生沉淀。 如：VB1与硅钨酸反应可生成组成一定的沉淀。 ＊重量法测定VB1含量。 ③?? 硫胺显碱性 具有两个碱性基团: ▲噻唑环上的季铵 ▲嘧啶环上的氨基 可以和酸成盐。 如：盐酸硫胺、硝酸硫胺。 ④?? 加碱分解后与醋酸铅反应 VB1与NaOH试液一起加热，分解产生NaS，可与PbAc2反应生成PbS的黑色沉淀。 ⑤维生素B1的水溶液显氯化物的特征反应。 （二）硅钨酸重量法 2、计算： 2VB1的分子量为2×337.27 沉淀的分子量为3479.22 换算因数=0.1939 （含义：1g沉淀相当于0.1939gVB1）　　 3、测定方法： 4、实验条件 （1）取样量： 应在50mg左右，不得少于25mg。 （2）加入盐酸的目的：易于过滤。 ＊酸量不足：沉淀的颗粒过细。 ＊酸量过多：无太大影响。 （3）