全反式维甲酸及硒联合氧化苦参碱干预大鼠肝癌变进程中端粒酶逆转录酶及体征的动态变化生理学专业论文.docxVIP

摘 摘 要 目的：探讨SD大鼠在肝癌变进程中及在全反式维甲酸(all trans retinoic acid，ATRA) 和硒(selenium，Se)分别联合氧化苦参碱(oxymatrine，OMT)的干预下，大鼠的体征指 标以及端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase，TERT)在肝组织中的动态变化。 为研究肝癌发生发展的分子机理及寻找新的肝癌治疗药物提供参考依据。 方法：以二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine，DENA)为诱癌剂，建立大鼠肝癌变不同 时期的动物模型，同时对其分别用OMT+ARTA和OMT+Se进行药物干预，自诱癌之日 起，分别在2、4、6、8、10、12、14、16、18w处死大鼠取其肝脏，通过组织石蜡切片、 免疫组化和免疫印记法(Western blot)，探讨大鼠肝癌演进及药物干预过程中，大鼠肝 脏TERT的表达变化情况。 结果：①病理结果：诱癌组大鼠在2-4W多呈轻度炎性反应(mild inflammatory reaction，MIR)，6．8w出现重度炎性反应(severe inflammatory reaction，SIR)，10—12w多 呈腺瘤样增生(adenomatous hyperplasia，AH)，14—16w以非典型腺瘤样增生 (atypical—adenomatous hyperplasia，AAH)为主，16-18w开始出现胆管上皮癌(cholangio cellular carcinoma，ccc)。②免疫组化：两个干预组与诱癌组TERT的阳性率均显著高 于对照组，整个癌变进程中对照组TERT几乎无阳性表达；OMT+ATRA干预组于AH 和AAH期的TERT阳性率均显著低于诱癌组(尸0．05)； OMT+Se干预组TERT的阳 性率于AH期显著低于诱癌组(P0．05)，AAH期极显著低于诱癌组(尸O．01)。TERT 的特异性染色主要集中在胞浆，在AAH、CCC期也可见于胞核。@Western blot：在 癌变进程中，对照组TERT蛋白的含量均处于极低的状态；诱癌组TERT的含量随诱癌 的进行而逐渐升高；两干预组TERT的含量在整个癌变进程中均低于诱癌组，至AH期 两干预组均显著低于诱癌组(氏0．05)；AAH期时，OMT+Se组TERT的表达量显著低 于诱癌组(PO．05)，OMT+ARTA组与诱癌组之间无明显差异。 结论：DENA诱发大鼠肝癌变进程中，TERT的表达逐渐升高。OMT+ARTA和 OMT+Se的干预可使TERT在AH和AAH期的表达降低，提示OMT、AR]阪及Se的 联合使用可在‘定程度．仁抑制TERT的表达，减缓肝癌变进程，提高生存质量及存活率。 关键词：月干癌，SD大鼠，苦参素，硒，全反式维甲酸，端粒酶，端粒酶逆转录酶 ABSTRAC ABSTRAC T objective：In this study,based SD rat liver model built in lab，all trans retinoic acid(ATRA)or selenium(Se)，combining with Oxymatrine(OMT)respectively were used intervention，to explore the dynamic changes of telomerase transcriptase(TERT)in hepatic tissues and some body indexes of the rat．This study will provide some references for studying the molecular mechanism of hepatocarcinogenesis，and looking for new liver therapy Methods：Diethylnitrosamine was used carcinogen to establish the rat modles of liver in different phases by intragastric administration，OMT+ARTA and OMT+Se were used intervention drugs during this process．1iver tissues were taken in the 2“o、4m、6m、8协、10m、 12m、14幽、 16伯、18m week respectively．The contents of TERT were studied and determined by immunohistochem