表面展示sta类毒素的蜡样芽胞杆菌重组菌株的构建及其对小鼠的免疫原性的测定预防兽医学专业论文.docxVIP

万方数据 万方数据 分类号 密级 华中农业大学硕士学位论文 表面展示 STa 类毒素的蜡样芽胞杆菌重组菌株的构建及 其对小鼠的免疫原性的测定 CONSTRUCTION OF BACILLUS CEREUS RECOMBINANT STRAINS DISPLAYING STA TOXOID ON CELL SURFACE AND ASSESSMENT OF Il\但\flJNOGENICITY OF RECOMBINANT STRAINS IN MICE 研究生:王云霄 学号: 2012302110154 指导教师:刘梅副教授 指导小组:毕丁仁教授 石德时教授 李自力副教授 栗绍文副教授 胡思顺副教授 肖运才副教授 王喜亮副教授 金卉副教授 孟宪荣讲师 周祖涛副研究员 专业=预防兽医学 研究方向 z 兽医微生物学与免疫学 授予学位名称:农学硕士 获得学位时间: 2015 年 6月 华中农业大学动物医学院 二零一五年六月 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 学位论文 是否保密 冶 如需保密，解密时间 年 月 日 独创性击晶 √IH丫zII$9314illlI|I|5IIII 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名：王易霭 时间：2々f乡年6月l 6日 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，靼学生必须按照学 校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版， 并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的金 部或部分内容，为存在馆际合作关系的兄弟高校用户提供文献传递和交换服务，同时 本人保留在其他媒体发表论文的权力。 注：保密学位论文(印涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论 文)在解密后适用于本授权书。 糊黼擀：；镩、一导 壤彩 签名日期：≥口l与年6月l 6日 签名日期：伽堰≈历形日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和嚣录之间 万方数据 万方数据 表面展示STa类毒素的蜡样芽胞杆菌重组菌株的构建及其对小鼠的免疫原性的测定目录 表面展示STa类毒素的蜡样芽胞杆菌重组菌株的构建及其对小鼠的免疫原性的测定 目录 摘要 ．i ABSTRACT jii 缩略语(Abbreviation) v 第一章文献综述 1 1产肠毒素大肠杆菌STa的研究进展 ．1 1．1产肠毒素大肠杆菌的毒力因子及致病机理 ．．1 1．2产肠毒素大肠杆菌STa的特性 ～2 1．3产肠毒素大肠杆菌STa疫苗研究概况 ．．2 2蜡样芽胞杆菌的特性 ．3 3细菌S．层蛋白的特性 ．4 3．1 S．层蛋白简介 4 3．2 S．层蛋白在疫苗研制中的作用 6 3．2．1 S．层蛋白通过化学偶联发挥作用 ．6 3．2．2 S．层蛋白通过基因融合发挥作用 ．6 3．3 S一层蛋白在苏云金芽胞杆菌表面展示中的应用 7 4研究目的与意义 ．9 第二章插入法构建重组菌株及其对小鼠免疫原性的测定 ．10 1材料与方法 10 1．1实验材料 10 1．1．1主要仪器 ．1 0 1．1．2质粒和菌株 ．10 1．1．3主要试剂 ． ．11 1．1．4实验动物 ．12 1．1．5试剂配制 ．12 1．2实验方法 ．1 5 1．2．1 STa类毒素基因msta的构建 ．．15 1．2．2重组质粒pCTC．S和pCSA-S的构建 15 1．2．3重组质粒的转化与鉴定 ．16 1．2．4重组菌株融合蛋白的表达检测 ．1 8 1．2．5重组菌株免疫小鼠的动物实验 ．19 2结果与分析 20 2．1 STa类毒素基因msta的构建 ．20 2．2质粒pMDl8T-S的构建 21 华中农业大学2015届硕士研究生学位论文2．3重组质粒pCTC．S和pCSA-S的构建 华中农业大学2015届硕士研究生学位论文 2．3重组质粒pCTC．S和pCSA-S的构建 ．21 2．4重组菌株皿1 58／pCSA-S的构建 22 2．5重组菌株融合蛋白的表达检测 ．22 2．6重组菌株免疫小鼠结果 ．23 3讨{念 24 4结{念 24 第三章替换法构建重组菌株及其对小鼠免疫原性的测定 ．．25 1材料与方法 25 1．1实验材料 ．2