峨参内酯与氟尿嘧啶联用对结肠癌肺癌多细胞球模型的影响及其作用机制研究中药学专业论文.docxVIP

西南交通大学硕士学位论文主要工作(贡献)声明本人在学位论文中所做的主要工作或贡献如下： 西南交通大学硕士学位论文主要工作(贡献)声明 本人在学位论文中所做的主要工作或贡献如下： 1、建立了结肠癌SW480、SW620以及肺癌A549三维立体多细胞球模型： 2、通过CCK8法检测得出峨参内酯对结肠癌SW480、SW620以及肺癌 A549平面细胞和多细胞球存在明显的抑制作用； 3、通过流式细胞技术和WsternBlot技术检测得出峨参内酯与5-FU联用能 够有效提高对上述三种多细胞球模型的抑制作用，阻滞细胞周期变化、 诱导细胞凋亡以及调控COX2与FAK信号转导通路可能是峨参内酯对 上述三种细胞的抑制作用机制之一。 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是在导师指导下独立进行研究工作所得 的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经 发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在文中作 了明确说明。本人完全了解违反上述声明所引起的一切法律责任将由本人承担。 学位论文作者签名：鬟椭咐 日期：hl b．c，．7 万方数据 西南交通大学硕士研究生学位论文 西南交通大学硕士研究生学位论文 第1页 摘要 目的：探讨峨参内酯与5-FU联用对人结肠癌SW480、SW620和肺癌A549三维 立体多细胞球模型的作用及其机制，为进一步阐明峨参抗肿瘤作用机制提供基础 研究数据。方法：建立结肠癌SW480、SW620和肺癌A549三维立体多细胞球 模型，采用CCK8法检测峨参内酯及峨参内酯与5-FU联用对三种三维立体多细 胞球模型的抑制作用；采用流式细胞仪观察分析峨参内酯与5-FU联用对三种三 维立体多细胞球模型细胞周期和细胞凋亡的影响；采用蛋白质印迹(Western blot) 技术检测分析峨参内酯与5-FU联用对三种三维立体多细胞球模型细胞中FAK、 COX2蛋白表达的影响。结果：峨参内酯对人结肠癌SW480、SW620和肺癌A549 三维立体多细胞球模型均有明显的抑制作用，呈现出一定的药物剂量依赖性，其 IC50值分别为26．82pg／na、34．2lpg／越、47．92I．tg／ml：峨参内酯与5-FU联用时， 各组细胞活力有显著降低，且随着峨参内酯浓度的加大而逐渐降低；5-FU可使 上述三种细胞周期停止在S期，峨参内酯可使上述三种细胞周期停止在S期、 G2／M期，两种药物配合使用，可使上述三种细胞周期停止在S期、GA／M期并 最终诱导细胞凋亡，并且能够明显抑制细胞中FAK、COX2两种蛋白的表达。结 论：峨参内酯能显著降低结肠癌SW480、SW620和肺癌A549平面细胞以及三 维立体多细胞球模型的细胞活力，且呈现出一定的药物剂量依赖性；与5-FU联 用能显著降低上述三种多细胞球模型的细胞活力，且随着峨参内酯浓度的加大细 胞活力逐渐降低；阻滞细胞周期变化、诱导细胞凋亡以及调控COX2与FAK信 号转导通路可能是峨参内酯对上述三种细胞的抑制作用机制之一。 关键词：峨参内酯；氟尿嘧啶；三维立体多细胞球；结肠癌；肺癌。 万方数据 西南交通大学硕士研究生学位论文 西南交通大学硕士研究生学位论文 第1I页 Abstract Objective：To investigate the effects of Anthricin combined with fluorotLracil and the mechanism onSW480，SW620 and A549 three·dimensional mulficellular spheroids models,providing the basic research data for further elucidate the anti-tumor mechanism of Anthriseus Sylvestris．Methods：Establishing the SW480，SW620 and A549 three dimensional multi-cellular spheroids model,testing Anthriein combined with fluorouracil in the inhibition effects on these three kind of three-dimensional multicellular spheroids models by CCK8 method；Testing Anthricin combined with fluorouracil in the influnences of the cell cycle and apoptosis on these three kind of t