木聚糖酶在工业上应用.docVIP

真菌中的木聚糖酶:性能及其在工业上的应用 摘要：木聚糖是半纤维素的主要类型。这是一个由木二糖通过1,4位糖苷键连接的线性聚合物。在自然界中，多糖的分子骨干可以被4-O-甲基-α-D-吡喃葡糖醛酸、乙酰基、α-L-阿拉伯呋喃糖基等比例添加。木聚糖的水解主要是酶的复合物承担，但主要参与的酶是内切β-1，4-D-木聚糖酶和β-D-木糖苷。这些酶可由真菌、细菌、酵母、海洋藻类、原生动物、蜗牛、甲壳类动物、昆虫、种子等产生,但是主要商业来源是丝状真菌。最近,有很多工业对木聚糖及其其水解酶感兴趣,主要是其可用于补充动物饲料、生产面包、食物和饮料、纺织品、纤维素纸浆的漂白、乙醇和木糖醇的生产。本文描述了一些木聚糖的特性和它的新陈代谢,木聚糖酶的生化特性以及其商业应用。 简介：木聚糖属于纤维素类，是世界上第二丰富的天然多糖(柯林斯等，2005年)。这些化合物存在于植物细胞的细胞壁和胞间层。木聚糖这个术语涵盖了一系列非纤维素类多糖,由不同的比例的单糖单元组成,如D-甘露糖、D-木糖、葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖、D-葡糖醛酸和D-半乳糖醛酸。半纤维素的命名是根据其主要的糖单元决定的。因此,当一个聚合物水解并产生木糖，它就可称为一个木聚糖;同样,半纤维素包括甘露聚糖、葡聚糖、阿拉伯聚糖和半乳聚糖(惠斯勒和理查兹2000)。在自然界中,在木材纤维素包含的糖往往不是一种。通常他们具有复杂的结构，是由很多的元素聚合而成,最常见的葡糖醛酸、阿拉伯葡糖醛酸、葡甘露聚糖、阿拉伯半乳聚糖和半乳葡甘露聚糖(Haltrichet1996和普雷玛2002)。大量的组成单元是不同的在不同的物种中，甚至在同种物种之间也是不同的。因此,半纤维素不是固定单一的化合物,但聚合物组件即植物纤维,每一个都有特有的属性。半纤维素主要包括木聚糖,它是经过木聚糖酶分解得到。真菌中的木聚糖酶具有有许多商业用途,如造纸、动物饲料、烘焙面包、果汁和葡萄酒行业,木糖醇的生产等。本文将介绍真菌木聚糖酶及其进展，和这些酶的工业应用。 一、木聚糖结构 阿拉伯木聚糖已确定在小麦、黑麦、大麦、燕麦、大米、高粱、以及其他一些植物中发现，如：盘固草、竹笋和黑麦草。尽管这些多糖是次要部分对于的整体的谷物,但它们是构成植物细胞壁的重要组成部分(Izydorczyk和Biliaderis 1995)。葡糖醛酸和葡糖苷酸阿拉伯木聚糖主要位于二层膜结构中，他是一种粘合剂，使非共价键结构与木质素、纤维素和其他聚合物形成一种共价键而粘合，对细胞壁的完整性起到至关重要作用。木聚糖在被子植物中是半纤维素的主要类贡献者，占总干重的15-30%,但在裸子植物中木聚糖的含量会少点，含有7- 12%(Haltrich 1996年)。 图1 O-乙酰基-4-O-甲基葡糖醛酸(a),硬木和阿拉伯-4-O-甲基葡糖醛酸(b),柔软木头的结构。木聚糖酶参与分解木聚糖的有:乙酰酯酶、α-葡萄糖醛酸酶、切木聚糖酶和α-L-阿拉伯呋喃。β-木糖苷酶(c)实现了水解；数据显示碳原子被Ac乙酰基群替换 葡糖醛酸是由β-D-吡喃木糖基组成的线性聚合物，通过（1-4)糖苷骨干(木糖) 单位联系在一起，如图1中所示。这种多糖骨干由4-O-甲基-α-D-吡喃葡糖醛酸单位、D-葡萄糖醛酸单位在位置4甲基化,和位置2或3被β-D-吡喃木糖基插入。被子植物(硬)中的葡糖醛酸在乙酰基上的替换率也很高(70-80%),主要是位置2和3上由β-D-吡喃木糖基替换,这也使得木聚糖可以部分溶解在水中(考夫兰和Hazlewood 1993)。 葡糖苷酸阿拉伯木聚糖通常在软木中被发现，他们都有相同的木聚糖骨干，但是每一个当中的由十个β-D-吡喃木糖基组成的单位结构会有由α-L-阿拉伯呋喃糖基代替(图1 b)。软木比硬木具有较高含量的4-O-甲基-α-D-吡喃葡糖醛酸单位。这些木聚糖并不是被乙酰化,而是因为他们的呋喃糖苷结构,使得树胶醛醣的边部分很容易被酸水解。从这以后，以后我们提到的葡糖醛酸和葡糖苷酸阿拉伯木聚糖都被认为是木聚糖(Antranikian 1997)。 二、木聚糖复合物 木聚糖酶的主要作用是催化水解木聚糖。这些酶主要是来自由微生物，他们参与植物细胞壁的分解,以及与其他酶水解多糖,并可以在一些种子萌发时消化木聚糖(例如在用大麦谷物生产啤酒的时候)。木聚糖酶也可以在海洋藻类、原生动物、甲壳类动物、昆虫、蜗牛和陆地植物的种子中找到(Antranikian 1997)。在微生物来源中,丝状真菌会把这些酶分泌到介子中，并且相比在酵母和细菌中，它的产酶水平非常高。木聚糖酶基因已经被人类从微生物的各种属中提取得到，并且已大肠杆菌中表达。在细菌中的木聚糖酶，不仅是生产中活动水平低于真菌的,也限制在细胞内或周质中。此外,酶在细菌中表达并不仅仅是通过转译