《SCT1002-1992-草鱼出血病组织浆灭活疫苗检测方法》.pdfVIP

准标网 免费下载 中华人民共和国行业标准 SC 1002一92 草鱼出血病组织浆灭活疫苗检测方法 主题内容与适用范围 本标准规定了草鱼出血病组织浆灭活疫苗制品的取样和试验方法，以及判定原则等。 本标准适用于草鱼出血病组织浆灭活疫苗的检测，不适用于检测其他鱼用菌(疫)苗。 2引用标准 SC 1001草鱼出血病组织浆灭活疫苗 NY 7成品检验的有关规定 3 取样 3. 1每批制品随机取样作为待检样品。取样量:制品在50瓶以下者，取2-4瓶;制品在50^10。瓶者， 取样5瓶;制品在100瓶以上者，取样10瓶。 3. 2在无菌条件下，将每批待检样品混匀，并分装到灭菌小瓶中，数量根据检测项目和要求而定，置于 4C冰箱中待检。 4 pH检验 采用经计量部门检定的市售pH比色计或精密试纸进行测试。pH值为5. 5-7.。者为合格品。如 pH小于5.5或大于7。，则为不合格品。 5 无菌检验 在无菌条件下，用生理盐水将待检疫苗稀释10倍，从每管吸取。. 2 mL的量分别接种到普通肉汤、 厌气肉肝汤和琼脂斜面上各一管，在37℃条件下培养96 h，均应无菌生长。如有菌体生长，则为不合格 口 / 口口。 6安全性检验 6.1试验容器 6.，.1选用容积为12 m的水泥池或水簇箱等容器。容器需配有控温和通气增氧装置。 6.1.2容器在使用前用100 ppm漂白粉水溶液消毒24 h，消毒后用自来水冲洗干净，并放人适量经活 性碳处理的自来水曝气24 h后待用。 6.2试验鱼种 6.2.1应选用全长为8^15 cm体质健壮，游动活泼，无任何损伤和疾病的当年草鱼种，并在试验前用 2%的食盐水浸浴5^10 min, 6.2.2将符合6.2.1条的鱼种放人符合6.1条规定的容器中，于28^-30℃水温下饲养，观察15d.所 有鱼均应活动正常。如发现有鱼种出现有出血病症状，则该批鱼种不得使用。 6.3 安全性试验 中华人民共和国农业部1992一11一06批准 1993一04一01 VA 免费标准网() 无需注册 即可下载 准标网 免费下载 Sc 1002一92 用无菌生理盐水将待检疫苗样品稀释10倍。取符合6.2条规定的鱼种10尾，将稀释后的疫苗用无 菌注射器对鱼种作腹腔或背肌注射，注射剂量为0. 3^-0.5 mL/尾。注射后的鱼种放入试验容器内，25- 28℃水体中饲养，观察15d，如发现有鱼患出血病，则该批疫苗为不合格。 7 效力检验 7.1 鱼种免疫 7.1.1按6.1条规定准备试验容器，按6.2条规定选择试验鱼种。 7.1.2将经安全试验的待检样品用无菌生理盐水稀释10倍，用无菌注射器对鱼种进行注射免疫，每尾 注射剂量为。.3^-0.5 mL，试验鱼种不少于25尾。注射后的鱼种在25-28℃的水温下饲养15^30 d, 该鱼种即为免疫鱼种。 了.2免疫保护率的测定 了.2，免疫鱼攻毒 病毒液的制备:按sc 1001附录A的规定制备未经灭活的活毒悬液(活毒悬液的毒力测定见 附录A), 7.2.12攻毒试验:用生理盐水将活毒悬液稀释成毒力强度为100 LDsu/0. 5 mL后，以0. 3-0. 5 mL/ 尾的剂量，分别注射经免疫的试验组鱼种和未经免疫的对照组鱼种各20尾。攻毒后的鱼种在25-28 C 的水体中观察15d，记录各组的死亡鱼数，计算死亡率。 7.2.2免疫保护率的计算 根据条的试验结果，按下式计算: 对照组鱼种死亡率一试验组鱼种死亡率 免疫保护率(%)= X100 对照组鱼种死亡率 判定:免疫保护率在80%