鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和16srrna甲基化酶基因及流行分布分析临床检验诊断学专业论文.docxVIP

温州医科大学硕士学位论文目 温州医科大学硕士学位论文 目 录 缩略词表 1 中文摘要 2 英文摘要 4 前言月Ⅱ舌 6 第一部分2 0 11～2 0 1 3年间临床分离鲍曼不动杆菌的耐药特性 材料和方法 8 结果 l 2 分析与讨论 l 5 第二部分鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶基因研究 材料和方法 l 6 结果 27 分析与讨论 28 第三部分blaoxA-23和armA基因阳性鲍曼不动杆菌分子流行病学分析 材料和方法 30 结果 一 ．32 分析与讨论 3 3 全文小结 34 正文参考文献 35 附录 39 致谢 40 综j苤 4 1 综述参考文献 55 论文独创性声明 69 万方数据 温州医科大学硕士学位论文缩略词表 温州医科大学硕士学位论文 缩略词表 万方数据 温州医科大学硕士学位论文鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和16S 温州医科大学硕士学位论文 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶基因及流行分布 中文摘要 目的 1．了解温州医科大学附属第一医院2011～2013年来临床分离的鲍曼不动杆菌的耐 药情况； 2．分析鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶的基因分布及特征； 3．探究碳青霉烯酶和16S rRNA甲基化酶的基因阳性菌株的同源性，为院内感染管 理与控制提供理论依据。 方法 1．回顾性分析2011-2013年间温州医科大学附属第一医院临床分离鲍曼不动杆菌 的感染分布和耐药情况； 2．测定鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物和氨基糖苷类药物的MIC；PCR方法筛查 鲍曼不动杆菌碳青霉烯酶耐药基因和16S rRNA甲基化酶的基因。 3．通过手工和试剂盒方法提取鲍曼不动杆菌的质粒，并通过PFGE和S1．PFGE Southern杂交的方法确定基因染色体或质粒的位置。 4．通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分析(MLST)的技术对b／aoxA．23和 armA基因阳性的菌株进行同源性研究，了解其流行特点。 结果 1．201 1～2013年温州医科大学附属第一医院临床分离的376株鲍曼不动杆菌标本 来源主要为痰液，占89．1％(335／376)，其次为创面，占2．7％(10／376)，血液，占1．9％ (7／376)，其他标本如腹水、尿液、脑脊液、导管引流等占6．3％(15／376)。病区的分 布主要以ICU科室为主占52％(196／376)，其次为神经外科和脑外科占14．1％(53／376)， 烧伤科占8．1％(30／376)。 2．鲍曼不动杆菌的耐药现象非常严重，除左氧氟沙星和头孢哌酮／舒巴坦耐药率在 65％以下外，其它药物的耐药率都达到了很高的水平，碳青霉烯类如亚胺培南和氨基糖 苷类药物如阿米卡星耐药率都接近80％。 3．PCR扩增B类碳青霉烯类金属酶基因(blalMP’blavIM，b[aNDM，btasIM，blaoIM)及D类 碳青霉烯酶基因(blaoxA．5l，blaoxA．23，blaoxA．48，btaoxa．58)和16S rRNA甲基化酶基因 (armA、rmtA、rmtB、rmtC、rmtD、rmtE、npmA)，其中blaoxA．51、blaoxA．23、6肠姗，、 armA基因的阳性率分别为100％、80．8％(84／104)、9．6％(10／104)和82．7％(86／104)。并 且通过Southern杂交表明b／aoxA-23和armA基因可能定位于细菌染色体上。 4．携带blaoxA-23基因和armA基因阳性的菌株对碳青霉烯类药物和氨基糖苷类药 万方数据 温州医科大学硕士学位论文物的耐药达到了很高的水平，对碳青霉烯类药物的MIC50和MICgo分别为1699／ml和 温州医科大学硕士学位论文 物的耐药达到了很高的水平，对碳青霉烯类药物的MIC50和MICgo分别为1699／ml和 3299／ml，对氨基糖苷类药物(阿米卡星、庆大霉素和妥布霉素)的MICso和MIC90 都2561ag／ml，耐药现象严重。 5．84株同时携带blaoxA．23和armA基因的鲍曼不动杆菌有A、B、C三个主要克隆 群。其中A克隆为46株，B克隆为20株，C克隆为7株，A克隆为最主要的克隆群。 选取A、B、C三个主要克隆菌株通过PCR扩增7个管家基因，MLST有5个ST型分 别是STl91、ST381、ST426、ST208、ST373，其中STl91和ST381是最主要的ST型。 结论 1．本院临床分离的鲍曼不动杆菌标本来源主要来自于痰液，主要分离的科室是 ICU，对多种药物耐药情况严重，多重耐药菌的比例居高不下。 2．本院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类药物和氨基糖苷类药物的耐药水平比较高，耐 药现象严重，blaoxA-23和armA基因分别是碳青霉烯