多房棘球蚴em95基因克隆原核表达及应用预防兽医学专业论文.docxVIP

Secrecy： Secrecy： No． Chinese Academy of Agricultural Sciences Dissertation Cloning，P roc aryotic Exp ression and Application of Em95 Gene from EchinOCOCCIIS multilocularis M．S．Ca ndidate：Li Jian—qiu Supervisor：Professor Jia Wan-zhong Majo r：Preventive Veterinary Medicine Specialty：Zoonoses and Veterinary Public Health May 2015 万方数据 独创性声明本人声明所呈交豹论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取褥的研究成 独创性声明 本人声明所呈交豹论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取褥的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他入已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业科学院或其它教育机构韵学位或证 书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所傲的任何贡献均己在论文中作了 明确豹说明并表示了谢意。 僦躲疹熏红帆触／弘5舡户 关于论文使用授权的声明 本人完全了解中国农业科学院有关保留、使用学位论文豹规定，即：中国农业科 学院有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩 印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中蓬农业科学院可以用不同方式在不 同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。 黜躲疹蓑红帆淞与月珥日 导师签名： 舒u 帆M咖习墨 万方数据 中国农业科学院 中国农业科学院 硕士学位论文评阅人、答辩委员会签名表 论文题目 多房棘球蚴Era95基因克隆、原核表达及应用 人兽共患病与兽 论文作者 李建秋 专 业 预防兽医学 研究方向 医公共卫生学 指导教师 贾万忠 培养单位(研究所) 兰州兽医研究所 硕(博) 姓名 职称 单 位 专业 签名 导师 评 尚依军 教授 硕导口 中图农业科学院兰州 预防兽医学 ＼＼ 博导口 兽医研究所 阅 入 孙晓林 教授 搏导口 甘肃农业大学 预防兽医学 ＼＼ 硕导口 笈 翔 辩 硕导口 主 景涛 教授 兰州大学 医学 席 博碍口 杨孝朴 教授 臻导口 甘肃农q乏大学 预防兽医学 秸槲 L／、 硕导口 魏锁成 教授 硕导口 西北民族大学 预防兽医学 撅囊戚 搏导口 答 硕导口 姐 一 景涛 教授 博导臼 兰州大学 医学翻 瓶二 硕导口 中盟农业科学院兰州 医学撬 夕 辩 蘩建平 研究员 博导口 兽医研究所 委 朱扇运 研究员 预防兽医学 缴．易 硕导日 中国农业科学院兰州I 员 博导口 兽医研究所 么 乡 刘光遨 研究员 辫导日 兽医研究所 预防蛰医学 参胁 硕导口 。l，翻农j|江科学院’皇州1 刘永生 研究员 颈导口 中困农业科学院兰州 预防罄医学 身缪 博导口 落医研究所 ／ 会议记录(秘书) 冈瓣郴 论文答辩时潮地点 2015年5月13闩于兰州兽医研究所综合楼tt圣娄会议室 万方数据 摘要多房棘球蚴病俗称泡球蚴病是由多房棘球绦虫的幼虫(多房棘球蚴、泡球蚴)寄生于人或动 摘要 多房棘球蚴病俗称泡球蚴病是由多房棘球绦虫的幼虫(多房棘球蚴、泡球蚴)寄生于人或动 物肝脏所引起的一种人兽共患寄生虫病，它的成虫主要寄生于狐狸、狼和犬的小肠内。本病主要 在北半球高纬度地区和冻土地带流行，但随着世界贸易和全球化进程的推进，该病有向南半球蔓 延的趋势。它不仅能严重危害人体的健康，而且还是一个严重的社会经济问题。目前，对于该病 的治疗主要是以手术切除为主，药物治疗为辅，但是由于泡球蚴呈肿瘤样无限浸润生长，手术切 除后能发生转移，因此对泡球蚴病的预防成为流行区各级政府所优先关心的问题。研究多房棘球 绦虫保护性抗原EM95的免疫保护作用对泡球蚴病疫苗研制与开发具有十分重要的意义。 本研究以NCBI数据库Era95基因序列作为参考序列设计引物，以多房棘球蚴总RNA反转录 产物为模板进行PCR扩增，获得Era95基因完整ORF序列，并对该序列进行了相关的生物信息 学分析。结果表明，EM95蛋白的编码基因长471 bp，与参考序列的相似性为100％，由156个氨 基酸残基组成，其上有2个N一糖基化位点，N端有一长为16个氨基酸的信号肽序列，C端有由 23个氨基酸组成的跨膜区，属于分泌型糖蛋白。B细胞抗原表位分析表明，EM95有6个潜在的 抗原表位，比EG95预测的抗原表位少一个。将全长的Era95基因和截去编码信号肽及跨膜区的 Era95基因分别克隆到原核表达载体中并转化到大肠杆菌Rosetta感受态细胞中，用