磁性纳米载体的制备及在酶固定化中的应用制药工程专业论文.docxVIP

分类号Q墨!垒 分类号Q墨!垒 密级 公珏 UDC 606 编号1029921215009 @江薛大擎 专业硕士学位论文 磁性纳米载体的制备及在酶固定化中的应用 Preparation of Magnetic Nanoparticles for Immobilization of Enzyme 指导教师 韭些旺 副教授 作者姓名 王蚕玉 申请学位级别 亟± 学科(专业)剑药工程 论文提交日期2Q1 5生§旦论文答辩日期2Q!§生鱼旦 学位授予单位和日期 江菱太堂2Q1 5生鱼月 答辩委员会主席 ．周爱堡塾捶 评阅人 万方数据 学位论文版权使用授权书 学位论文版权使用授权书 IIII丫II／Iz／HIIIIaIIIIIuIIIIII叼INIIIIIIl8IIIIIl7II／IIII 江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊(光盘版) 电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、 缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致， 允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入《中国 学位论文全文数据库》并向社会提供查询，授权中国学术期刊(光盘版)电子杂 志社将本论文编入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》并向社会提供查询。 论文的公布(包括刊登)授权江苏大学研究生院办理。 本学位论文属于不保密一。 学位论文作者签名： 据山 指导教师签名：弓砭∥艺／ 矽ft年易月f调 WJ牌6月I凋 万方数据 独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 独创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究 工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外，本论文不包含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已 在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 据如 日期： 劢fr绛占||日J≥闫 万方数据 江苏大学硕士学位论文摘要 江苏大学硕士学位论文 摘要 由于具备超顺磁性、生物兼容性和低毒性，磁性Fe304纳米材料已成功应用 于药物输送系统，高热治疗癌症，磁共振成像(M砌)造影剂，金属和有机材料的 分离，通过与不同有机物复合可得到兼具无机纳米粒子和有机物性质磁性颗粒。 本论文制备了两种磁性复合载体Fe304@chitosan和Fe304@OA@DP，并考 察了脂肪酶在两种磁性纳米载体上的固定化及青霉素酰化酶在磁性 Fe304@chitosan纳米载体上的固定化。 论文第二章采用共沉淀法在碱性溶液中共沉淀铁盐和壳聚糖，然后经高温处 理制备稳定的磁性Fe304@chitosan纳米粒子。透射电镜观测的结果显示制备的 磁性纳米粒子呈现核．壳结构的球状，平均粒径为25 am左右。通过傅立叶变换 红外光谱检测，磁性Fe304@chitosan的谱图中含有氨基和羟基的特征峰，说明 壳聚糖成功包覆在磁性Fe304纳米粒子表面。以此磁性纳米颗粒为脂肪酶固定化 的载体，通过先物理吸附后化学共价连接的方法即(CCEE)法，在最佳固定化 条件：脂肪酶浓度0．396 mg／n[1L，时间4 h，pH 5．0，温度30℃，加入O．1 M EDC 时，获得的磁性固定化脂肪酶酶活力回收率可达到75％，载体的蛋白吸附量可达 到16．8 mg／g。与游离脂肪酶相比，固定化脂肪酶的最适pH也为9．0，最适反应 温度提高了10℃，60℃的半衰期延长了1．5 h，且具有良好的操作稳定性，重 复使用十次以后仍保留有70％以上的酶活。最后测定了固定化酶的‰为28．73 mM，最大反应速度为2．26 mmol／min，分别是游离酶的1．35倍和0．4倍。 论文第三章首先采用共沉淀法制备的磁性Fe304纳米粒子，然后用溶胶．凝 胶法在其表面包裹一层油酸，得磁性Fe304@OA纳米粒子，最后利用多巴胺自 聚．氧化作用对复合载体Fe304@OA进行表面修饰，制备表面具有大量活性基团． 醌基的载体。透射电镜下，颗粒呈球状，粒径约为15 nlTl，分散性良好。通过傅 立叶变换红外光谱仪检测，载体表面的油酸的特征峰被改变，说明多巴胺通过与 油酸发生反应而包覆在其表面。以磁性Fe304@OA@DP纳米粒子为载体，利用 聚多巴胺表面醌基与脂肪酶分子中的自由氨基发生Michael addition和Schiff base formation反应将脂肪酶固定在载体上。实验确定磁性载体Fe304@OA@DP 固定化脂肪酶的最佳条件为：脂肪酶浓度0．264 mg／mL，时间为10 h，pH为7．0， T 万方数据