一种来源于运动替斯崔纳菌KA081020-065新型卤.PDFVIP

生 物 工 程 学 报 王雷 等/一种来源于运动替斯崔纳菌KA081020-065 的新型卤醇脱卤酶的表达纯化及性质分析 659 Chinese Journal of Biotechnology /cjbcn May 25, 2015, 31(5): 659−669 DOI: 10.13345/j.cjb.140427 ©2015 Chin J Biotech, All rights reserved 工业生物技术 KA081020-065 1,2 2 2 3 3 3 2 1 2 王雷 ，袁京 ，姚培圆 ，程丽华 ，解美仙 ，贾荣荣 ，冯进辉 ，王敏 ，吴洽庆 ， 朱敦明2 1 300457 2 300308 3 051130 , , , . KA081020-065 . , 2015, 31(5): 659–669. Wang L, Yuan J, Yao PY, et al. Expression and characterization of a novel halohydrin dehalogenase from Tistrella mobilis KA081020-065. Chin J Biotech, 2015, 31(5): 659–669. 摘 要: 卤醇脱卤酶 (Halohydrin dehalogenase) 不仅对于含氯污染物的生物降解、净化环境具有重要意义，而 且在手性医药中间体合成中也是一种重要的生物催化剂，但其数量较少。采用基因挖掘在基因组数据库中获得 一种来自运动替斯崔纳菌Tistrella mobilis KA081020-065 的新型卤醇脱卤酶基因HheTM ，将该基因克隆、表达 在大肠杆菌 BL21 (DE3) 中，利用镍柱亲和层析将该酶进行纯化并研究了其酶学性质。HheTM 是一种同源四 聚体；最适温度为50 ℃；不同的 pH 缓冲液对其活性有较大影响；在碱性、30 ℃以下的条件下稳定性高。在 氰根离子存在的条件下，HheTM 能够催化(S)-4-氯-3-羟基丁酸乙酯合成(R)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯，为酶法合 成阿托伐他汀关键中间体提供了一种新的卤醇脱卤酶。 : 卤醇脱卤酶，运动替斯崔纳菌，(R)-4-氰基-3-羟基丁酸乙酯 Received: August 26, 2014; Accepted: November 14, 2014 Supported by: Key Deployment Project of Chinese Academy of Sciences (No. KSED-EW-Z-015). Corresponding author: Qiaqing Wu. Tel: +86-22 Fax: +86-22 E-mail: wu_qq@ Dunming Zhu. Tel: +86-22 Fax: +86-22 E-mail: zhu_dm@ (No. KSED-EW-Z-015) 660 ISSN 1000-3061 CN 11-1998/Q Chin J Biotech May 25, 2015 Vol.31 No.5 Expression and characterization of a novel halohydrin dehalogenase from Tistrella mobilis KA081020-065 1,2 2 2 3 3 3 Lei Wang , Jing Yuan , Peiyuan Yao , Lihu