腐熟用枯草牙孢杆菌菌剂的研制生物工程专业论文.docxVIP

Secrecy Secrecy Rate： Publicized Classified Index：Q819●_H-—_。●_。●。。●_●_____’●-。。__。_一 UDC：606 University Code： 10082 Hebei University of Science and Technology Dissertation for the Master Degree Study on Microbial Agent of Bacillus s ubtilis for Animal Manure compo sting Candidate： Wang Yuli Prof．Zhao Guoqun Supervisor： Enterprise Supervisor： Prof．Guan Junfeng Academic Degree Appplied for： Master of Engineering Speciality： Biology Engineering Employer： School of Biological Science and Engineering Date of Oral Examination： May，2015 万方数据 河北科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工 河北科技大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工 作所取得的成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方 式标明。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发 表或撰写过的作品或成果。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名：王玉魂 黼导 狮师 姑名 研 勿圬年手月／3日 抄劓 埤车 舻月 惑如 河北科技大学学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留 并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本 人授权河北科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 口保密，在一年解密后适用本授权书。 本学位论文属于 前保密。 (请在以上方框内打“寸’) 学位论文作者签名：立炙i习 匕日 导 粼师 鏊 拜 勾肘年年月／岁日 少如心 远 万方数据 摘要摘 摘要 摘 要 腐熟菌剂主要是指针对畜禽粪便，植物残体以及一些生活废弃物等难分解的有 机物进行处理而研究生产出的一类微生物茵剂，广泛应用农作物秸秆、畜禽粪便的 资源化和无害化处理。枯草芽孢杆菌是在自然界广泛存在的一种好氧的产芽孢杆菌。 它可以产生蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和半纤维素酶等酶，是农作物秸秆、畜禽粪 便等有机物料腐熟菌剂的主要菌种之一。芽孢数和有效活菌数是腐熟菌剂质量的重 要指标。生产成本也是微生物菌剂生产企业所关心的重要问题。本课题研究了枯草 芽孢杆菌DK36的产芽孢条件，优化了发酵工艺。在此基础上，研究了菌剂的制备 工艺。为了降低生产成本，进行了以脱酚棉籽蛋白为氮源培养枯草芽孢杆菌DK36 的研究。其主要研究结果如下： 1)枯草芽孢杆菌DK36的产芽孢条件研究。当葡萄糖、蔗糖、果糖、可溶性淀 粉、玉米粉、麸皮为碳源时，菌体生长良好。葡萄糖和蔗糖作碳源时均不产生芽孢。 当麸皮作为碳源时，形成的芽孢最多。其次为玉米粉、可溶性淀粉。蛋白胨、酵母 浸粉、大豆蛋白胨、豆饼粉、硝酸钾、硝酸钠、硝酸铵均可使菌体大量形成芽孢， 其中大豆蛋白胨的效果最好。尿素抑制菌体生长和芽孢形成。添加Ca2+、Mg：+、 Na+、Fe2+、Mn2+均可促进芽孢的形成，其中效果最明显的是硫酸锰。Cu2+对生长 和形成芽孢均有很大抑制作用。产芽孢最佳培养基：麸皮1 5．0 g／L、大豆蛋白胨5．0 ∥L、硫酸锰0．1∥L、碳酸钙3．0 g／L。最佳产芽孢发酵条件：培养温度30*C、转速 200 r／rain、接种为2％、培养基初始pH为7．0，芽孢数达3．6×109 cfu／mL。 2)脱酚棉籽蛋白培养枯草芽孢杆菌DK36的研究。棉籽蛋白作为氮源时，菌 体生长良好。碳源的种类对产芽孢有显著影响。葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮均使 菌体生长良好。但葡萄糖和蔗糖为碳源，菌体不形成芽孢，而玉米粉和麸皮可使菌 体产生大量芽孢。添加Ca2+、Mn2+、M92+和K+对芽孢形成有明显的促进作用，并且 发现钾盐与镁盐、锰盐、钙盐复合效果更佳。研究还发现，脱酚棉籽蛋白作为氮源 会造成芽孢形成缓慢。脱酚棉籽蛋白培养枯草芽孢杆菌的最佳培养基：玉米粉30．0 ∥L、棉籽蛋白30．0∥L、硫酸镁2．0 g／L、磷酸