α7nachr激动剂对体外循环大鼠肠神经胶质细胞的影响麻醉学专业论文.docxVIP

目 目 录 一、摘要 ． ．．1 (一)中文摘要 ． 1 (--)英文摘要 ． 4 二、正文．． ．7 (-7)前言 ． 7 (二)材料和方法 ．9 1．材料 一 ． 9 1．1主要仪器和设备 ．9 1．2主要药品和试剂 ．9 2．方法 ．10 2．1实验动物 ． ．10 2．2实验分组 ． ．1 0 2．3模型建立 一 1 1 2．4标本采集与处理 ． ．12 2．5标本检测 ．．12 2．6数据统计与处理 ．14 (三)结果 14 1．大鼠肠组织形态学观察 ．．14 2．炎症因子和肠损伤标志物的ELISA检测 ．．15 3．肠紧密连接蛋白的Western．blot检测 21 万方数据 4．肠神经胶质细胞标志物GFAP及S一100蛋白检测 4．肠神经胶质细胞标志物GFAP及S一100蛋白检测 ．．23 (四)讨论 ．．26 (五)结论 ．32 (六)参考文献 ．33 三、综述 ．37 (一)综述 ．．37 (二)参考文献 ．43 四、病例汇报 ．46 五、附录 48 六、攻读学位期间发表文章情况 49 七、致谢 50 万方数据 大连医科大学硕士学位论文Gt7nAchR激动剂对体外循环大鼠肠神经胶质细胞的影响 大连医科大学硕士学位论文 Gt7nAchR激动剂对体外循环大鼠肠神经胶质细胞的影响 硕士生姓名：伊小婷 指导教师：孙莹杰 副教授 专业名称：麻醉学 摘 要 目的： 通过观察大鼠肠神经胶质细胞(Emetic gliacells，EGCs)在体外循环致肠屏障 损伤中的变化特点，进而探讨cc7nAchR激动剂对体外循环大鼠EGCs的影响与可 能机制。 方法： 选择成年清洁SD大鼠96只，400～5009，按随机数字表法随机分为4组，分别 为假手术组(S组)、体外循环(CPB)组(C组)、PHA568487+体外循环(CPB) 组(P组)、MLA(Methyllycaconitine)+PHA568487+体外循环(CPB)组(M组)， 每组按各采血时相点分为4个亚组，每一亚组6只大鼠。实验大鼠术前禁食6h， 不禁水，腹腔注射10％水合氯醛麻醉(300mg／kg)。S组麻醉后经左股动脉、尾 动脉、右股静脉及右颈内静脉穿刺置管；C组麻醉置管后建立体外循环(CPB)模 型，维持时间为l小时；P组麻醉置管并给予PHA568487(0．8mg／kg)腹腔注射30min 后建立体外循环(CPB)模型；M组麻醉置管并给予PHA568487(0．8mg／kg)腹腔 注射，30min后再给予MLA(6mg／kg)腹腔注射，并建立体外循环(CPB)模型。 随后各实验组分别在CPB开始时(TO)、CPB60min(T1)、停CPB后2h(T2)、停 CPB后6h(T3)时间点于右颈内静脉采集血液标本，记录血流动力学变化及血气分 析结果，ELISA法检测血清白细胞介素6(IL一6)、肿瘤坏死因子0【(TNF-0【)、 D一乳酸、肠脂肪酸结合蛋白(I—FABP)的变化；分别于各时间点脊椎脱臼法处死 万方数据 大连医科大学硕士学位论文实验大鼠后取空、回肠组织制作病理切片，HE染色观察各组形态学变化； 大连医科大学硕士学位论文 实验大鼠后取空、回肠组织制作病理切片，HE染色观察各组形态学变化； Western．blot法检测肠粘膜紧密连接蛋白ZO一1、Occludin及肠胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)、钙结合蛋白(s．100)的表达变化；免疫组化法观察CPB后EGCs的 变化。统计学分析与处理可利用SPSSl9．0软件，结果用均数±标准差(i 4-s)表示， 单因素方差分析用于组问比较，重复测量设计的方差分析用于组内比较，当p0．05 时证明差异有统计学意义。 结果： 1．大鼠肠组织形态学变化结果 各组大鼠肠粘膜组织切片均选取T2时问点进行比较。 光镜下HE染色显示，S组肠粘膜未见明显改变；C组肠粘膜出现不同程度的 损伤，绒毛缩短，肠粘膜出血、水肿，炎性细胞浸润，肠上皮细胞变性、坏死；P 组和M组肠粘膜损伤均减轻，P组损伤最轻，仅有轻度肠粘膜腺体扩张，肠上皮 细胞轻度变性，少量炎性细胞释放。 2．血清IL．6和n寸F．0l水平的变化 与S组比较，C组、P组和M组大鼠血清IL．6和TNF．旺水平在T1~T3时间点 均升高，差异有统计学意义(p0．05)；与C组比较，P组和M组大鼠血清IL．6 和TNF—o【水平在T1～T3时间点均降低，差异有统计学意义(p0．05)：与P组比 较，M组大鼠血清IL．6和TNF．C【水平在T1～T3时间点均升高，差异有统计学意义 (p0．05)。 3．血清D一乳酸和I-FABP水平的变化 与s组比较，c组、P组和M组大鼠血清D．乳酸和I-FABP水平在T1～T3时 间点均升高，差异有统计学意义(p0．05)