枫香基因转化体系的研究以及枫香agamous基因的初步功能分析园林植物与观赏园艺专业论文.docxVIP

一删嬲必华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 一删嬲必 华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书 一 学位论文 L 如需保密，解密时间 砭巩口if-8-只≯B 是否保密 独创性声明 本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得华中农业大学或其他教育机构的学位或证书 而使用过的材料，指导教师对此进行了审定。与我一同工作的同志对本研究所做的任 何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。 研究生签名： 许棒 时间： 助口g年 6月，厂日 学位论文使用授权书 本人完全了解华中农业大学关于保存、使用学位论文的规定，即学生必须按照学 校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版和电子版， 并提供目录检索和阅览服务，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位 论文。本人同意华中农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全 部或部分内容，并授权中国科学技术信息研究所和北京万方数据股份有限公司将本人 学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并进行信息服务(包括但不限于汇编、 复制、发行、信息网络传播等)，同时本人保留在其他媒体发表论文的权力。 注：保密学位论文(即涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论 文)在解密后适用于本授权书。 学位论文作者签名：碑林 锄签名：易料 签名日期： ∥占年‘月，多日 签名日期：测年么 月／么日 注：请将本表直接装订在学位论文的扉页和目录之间 华中农业大学2008届博士学位论文目 华中农业大学2008届博士学位论文 目 录 摘 要 ．1 Abstract ．3 缩写名词表 ．6 第一章文献综述 7 前言日U舌 77 1．1木本植物组织培养的发展概况 ．．8 1．2 TDZ在木本植物组织培养中的应用 ．．10 1．3木本植物基因工程研究进展 11 1．3．1根癌农杆菌介导的遗传转化机理 ．12 1．3．2影响根癌农杆菌介导木本植物基因转化的因素 13 1．4利用基因工程创造不育植株的研究进展 ．．14 1．5 MADS．box基因家族和花器官发育的ABC模型 15 1．5．1 MADS．box基因家族 15 1．5．2经典的ABC模型及其发展 ．16 1．5．3四聚体模型 17 1．6 AGAMOUS(彳G)基因研究进展 ．．18 1．6．1 AG基因的结构和同源基因的克隆分析 ．．18 1．6．2 AG基因的表达调控 19 1．7植物基因功能研究策略 ．20 1．7．1基因功能丧失方法 21 1．7．2基因功能增加方法 23 1．8枫香属植物生物技术及育种研究进展 ．24 1．9研究方案以及本研究内容 ．．25 第二章枫香基因转化受体系统的建立及基因转化初探 27 2．1引言 ．．．． ．．27 2．2枫香离体快繁体系的建立 ．．27 2．2．1植物材料 ．27 。27．．27 。27 ．．27 ．．28 ．．28 。28 。28 。28 ．．28 一29 ．．29 ． ．． ．．29 ．．30 。30 ．．30 一30 ．．30 ．．30 ．．31 ．．31 。31 ．．3l 。32 ．．34 。34 。38 。43 ．．46 ．．48 华中农业大学2008属博士学位论文2．7问题与讨论 华中农业大学2008属博士学位论文 2．7问题与讨论 ．52 2．7．1基本培养基的选择 52 2．7．2关于长期继代激素累积对枫香无菌苗快繁的影响 52 2．7．3 TDZ对枫香不定芽伸长的抑制作用 53 2．7．4光照条件对枫香叶片再生的影响 53 2．7．5木本植物试管苗的移栽成活的关键技术 54 2．7．6转化细胞再生的问题 54 2．7．7选择策略的问题 55 2．7．8 T-DNA在植物基因组中的整合 56 2．8下一步工作 。56 第三章枫香AGAMOUS基因在烟草中的初步功能分析 57 3．1引言 57 3．2植物材料 ．57 3．3菌株、质粒、试剂 ．57 3．4试验方法 。58 3．4．1枫香花芽的总RNA提取 ．58 3．4．2 eDNA第一链合成 ．58 3．4．3枫香AGAMOUS基因的克隆与序列分析 ．．59 3．4．4质粒DNA的提取 59 3．4．5植物表达载体构建 60 3．4．6农杆菌的转化 61 3．4．7烟草的遗传转化 61 3．4．8转基因植株和未转基因植株的形态比较 62 3．5结果与分析 ．63 3．5．1枫香花芽总RNA提取 ．63 3．5．2枫香AG同源基因的克隆与序列分析 63 3．5-3 LfAG基因的植物表达载体构建 ．．66 3．5．4转基因卡那霉素抗性烟草植株