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大肠杆菌重组乳链菌肽抗性蛋白（NSR）的表达纯化及其功.PDF
微生物学通报 OCT 20, 2009, 36(10): 1519~1525
Microbiology © 2009 by Institute of Microbiology, CAS
tongbao@
研究报告
大肠杆菌重组乳链菌肽抗性蛋白(NSR)的
表达纯化及其功能分析
1,2 2 2 1 2*
刘家乐 孙志增 刘一苇 高学玲 钟 瑾
(1. 230036)
(2. 100101)
摘 要: 乳链菌肽(Nisin)是由某些乳酸菌产生的一种阳离子抗菌肽, 而 Nisin 抗性蛋白(Nisin re-
sistance protein, NSR)的表达则使一些非 Nisin 产生菌获得 Nisin 抗性。为深入探索 NSR 的作用机
制, 本研究在大肠杆菌中表达了去除 N 末端 38 个氨基酸残基的 NSR(NSRΔ38)与 GST 的融合蛋白
GST-NSRΔ38。通过谷胱甘肽(GSH)亲和层析和 GST 标签的切除后, 得到纯化的 NSRΔ38, 并测定
了该蛋白可能的nisin 降解活性。反应产物的抑菌活性测定结果表明被 NSRΔ38 作用后的 Nisin 丧
失了抑菌活性, 而反相高效液相层析(RP-HPLC)分析结果进一步表明这是由 NSRΔ38 具备 Nisin 降
解活性所造成的。本研究为 NSR 功能的深入研究奠定了工作基础。
关键词: 乳链菌肽, 乳链菌肽抗性蛋白, 末端特异性蛋白酶, GST 融合蛋白
Purification and Functional Analysis of Recombinant Nisin
Resistance Protein (NSR) Expressed in Escherichia coli
LIU Jia-Le1,2 SUN Zhi-Zeng2 LIU Yi-Wei2 GAO Xue-Ling1 ZHONG Jin2*
(1. Colleage of Tea Food Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei, Anhui 230036, China)
(2. Institute of Microbiology, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China)
Abstract: Nisin is a cationic antimicrobial peptide produced by some lactic acid bacteria. However, expres-
sion of nisin resistance protein (NSR) could confer nisin resistance on some non-nisin-producing Lactococ-
cus lactis. To deeply elucidate molecular mechanism underlying NSR-mediated nisin resistance, an NSR
mutant with N-ter
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